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人可溶性增殖诱导配体(hsAPRIL)是TNF家族的一个较新的成员，它与人B淋巴细胞刺激因子(hBAFF)同属肿瘤坏死因子超家族的成员，且在该家族中两者最为接近。本文从人外周血液总RNA中克隆出hsAPRIL cDNA，利用pET-30a这一原核表达载体成功构建并表达了hsAPRIL蛋白，在对其进行变复性后得到了其活性蛋白，并进行细胞活性鉴定，证明所得到的确为其活性形式。另一方面以APRIL蛋白为抗原免疫实验兔，通过心脏取血从血清中得到其抗体，并通过饱和硫酸铵沉淀法以及Protein-A凝胶柱纯化该抗体，利用western blotting鉴定抗体，后以ELISA来测定该多抗的效价。实验设计及结果如下：1 hsAPRIL cDNA基因的钓取，蛋白的表达、纯化及活性鉴定利用RT-PCR技术从健康人新鲜外周血中钓出增殖诱导配体基因，将其克隆于原核表达载体后，在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达目的蛋白，并通过Ni-IDA亲和层析柱对该蛋白进行纯化，纯化后的蛋白通过透析变复性后得到有活性蛋白，再利用其促进肿瘤细胞增殖这一特性来鉴定其活性。2 hsAPRIL多克隆抗体的制备及纯化将已制备好的抗原每隔10-15天免疫试验兔，在第三次免疫后从兔耳静脉取血，测其效价。在确定多抗确有其特异性后从心脏取血得到抗血清。在利用饱和(NH4)SO4沉淀法将抗血清初步纯化后再利用Ptotein-A亲和层析柱对其进一步纯化。纯化产物用western blotting以及ELISA检测和测定其效价。