神经干细胞是指神经系统中终生保持增殖能力和分化潜能的细胞,处于高度未分化状态,可通过对称或不对称分裂,生成新的干细胞和分化潜能逐渐降低的子细胞,最终产生中枢神经系统的三种主要细胞,即:神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。神经干细胞可从多种哺乳动物(包括人类)的胚胎和成体脑内分离取得,并可在体外长期保持其自我更新及多向分化潜能。在生长因子或特殊信号存在的情况下,可以一定程度的诱导神经干细胞分化为特定的神经细胞。 机械性脑损伤在平、战时均极为常见,其伤残率和致死率居全身各部位损伤之首。脑损伤的机制主要如下:首先是弥漫性的细胞死亡;然后是二次细胞损伤,即细胞的凋亡;最后是激活的星形胶质细胞形成胶质斑痕。目前临床上脑损伤治疗措施的疗效都不很确切,主要是很难达到修复受损神经元、突触联系及恢复神经功能的目的。而神经干细胞的研究则为脑损伤的治疗提供了新的手段。 利用神经干细胞移植治疗脑损伤必须要解决神经干细胞的来源问题;外界环境对神经干细胞的影响;移植细胞在体内存活分化及对损伤的治疗能力等问题。本实验分别从以下几方面来解决这些问题。 第一部分 小鼠神经干细胞的体外培养及外界环境对其增殖分化能力影响的初步研究 1、小鼠神经干细胞的体外培养及鉴定 取孕13d昆明小鼠胎脑,分离后用含表皮生长因子及碱性成纤维细胞生长因子的DMEM条件培养基进行培养,定期传代。随培养时间延长,培养细胞数量扩增,并形成悬浮存在的神经