【摘 要】
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目的探讨氨引起脑水肿后P-Erk1/2通路和水通道蛋白4之间的先后表达情况。方法实验将60只小鼠分为2组:空白对照组(Blank Group,n=10),尿素酶组(Urease,n=50),尿素酶组分为5个时间
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目的探讨氨引起脑水肿后P-Erk1/2通路和水通道蛋白4之间的先后表达情况。方法实验将60只小鼠分为2组:空白对照组(Blank Group,n=10),尿素酶组(Urease,n=50),尿素酶组分为5个时间段每天腹腔注射(33 U/kg),空白组用等量生理盐水腹腔注射,第一组当天注射尿素酶6 h后水合氯醛麻醉后断头取脑,第二组第二天继续注射尿素酶后6 h断头取脑,其余三组同理。用Western Blot检测水通道蛋白4(AQP4)的表达情况,选择AQP4表达最高时间点进行脑干湿重测量。取24 h以内刚出生的乳鼠,采用断头法取出大脑,剪碎、消化,置于皿中培养一个月后分别进行MTT、Western Blot、免疫荧光等技术来检测细胞增殖、AQP4及P-Erk1/2等相关蛋白表达情况。结果注射尿素酶建立高氨模型后,发现第二天脑水肿相关蛋白AQP4升高最明显(P<0.01),脑干湿重测量结果也较对照组高(P<0.05),MTT细胞增殖实验发现氯化铵浓度在5 mM时不会引起星型胶质细胞死亡,相反有些微促进生长作用(P<0.01),加氨处理的星型胶质细胞2 h P-Erk1/2表达增加,随后24 h AQP4表达增加,免疫荧光进一步验证了氨处理24 h AQP4表达增加。结论氨处理星型胶质细胞后,先通过P-Erk1/2通路,进而引起AQP4表达增加,导致脑水肿。
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