猪精液冷冻技术在猪育种、猪种质资源的保护等方面有重要现实意义。一方面，可以使一些优秀地方品种种质资源以精子库的形式得到无限期保护，为将来的猪品种培育提供育种材料；另一方面，猪的冷冻精液使人工授精技术不再受时间、地域限制，便于开展国内、国际间种质资源交流，提高优良种猪的利用率；同时，猪冷冻精液还可为猪品种培育过程中获得稳定遗传育种进展和生物安全提供保障。但由于猪精子的生物学特性，猪精子在冷冻-解冻过程中更容易受到损伤，与常温保存精液人工授精效果比较仍有很大差距，而且猪精液的射精量大，不能采用类似牛冷冻精液制作方法。目前，国际上关于猪冷冻精液的研究仍处于试验研究阶段。 本论文研究内容主要有以下三方面内容。 试验一维生素E(VE)被认为是动物机体内外较好的抗氧化剂，许多研究表明，对牛、羊和猪等家畜的精液冷冻有明显效果，有报道认为VE与硒和维生素C等均存在互作效应，结合使用可以取得比单独使用VE更好的效果，目前未见有关于维生素E与透明质酸互作效应的相关报道。一般认为，HA对精子顶体有很好的保护作用，能够抑制冷冻-解冻过程中的“类获能变化”。本试验通过两因素交叉设计，研究了维生素E(VE)、透明质酸(HA)及二者间互作效应对猪精液冷冻保存的影响。结果表明，在冷冻保存液中添加VE或HA均能显著提高猪精液冻后活率和顶体完整率(P＜0.05)。VE添加水平为600μg/mL时，活率和顶体完整率分别为42.67％和44.83％，显著优于其它添加水平及对照组(P＜0.05)；HA添加水平为800μg/mL时，其精子活率和顶体完整率分别为41.50％和42.67％，和其它添加水平及对照组均存在明显差异(P＜0.05)；VE和HA存在极显著的互作效应(P＜0.01)，效果较好的配伍为VE600μg/mL和HA400μg/mL，其活率和顶体完整率分别为43.33％和51.50％； 试验二如何提高生物安全性对家畜精液冷冻研究和应用至关重要。大豆卵磷脂作为一种植物提取物，具有类似卵黄中具有抗低温打击保护能力的主要功能性成份，愈来愈受到相关研究者的关注。国外有报道已开发出含大豆卵磷脂的牛精液冷冻保存液配方，国内在羊上也有报道。本试验以卵黄添加组和低密度脂蛋白(LDL)组作对照，研究了大豆卵磷脂替代卵黄对猪精液冷冻保存的影响。结果表明，添加6％大豆卵磷脂可明显提高猪精液冷冻效果，其解冻后活率、质膜完整率和项体完整率分别为44.33％，45.32％和61.95％，显著优于卵黄对照组和其它大豆卵磷脂添加水平(P＜0.05)，但效果却低于9％的低密度脂蛋白(LDL)(P＜0.01)； 试验三含有大量海藻糖的一些微生物、低温休眠脊椎动物表现出极强的抗低温保护作用，海藻糖已被广泛应用在精子等细胞冷冻保存。一些研究揭示对几种动物精子的冷冻效果均有一定提高，但都没有达到预期效果。EDTA常作为螯合剂用在各种动物精液的常温和冷冻保存中，与溶液中Ca2+离子发生螯合反应，减少冷冻过程中“类获能”对精子的危害。有报道在羊精液冷冻中，海藻糖与EDTA结合使用取得较好效果，但在猪精液冷冻中未见相关报道。本试验研究了海藻糖和两个添加水平的EDTA对猪精液冷冻保存的影响。结果表明，添加0.035g/mL海藻糖可明显提高猪精液冷冻保存效果(P＜0.05)。与对照组相比较，添加1.0g/L的EDTA明显降低了冻后精子活率(P＜0.05)，但明显提高了冻后精子顶体完整率(P＜0.05)。0.035g/mL海藻糖与1.0g/L的EDTA间存在互作效应(P＜0.05)，其冻后精子活率、质膜完整率和顶体完整率分别为44.67％，43.50％和64.33％，明显优于对照组等(P＜0.05)。