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透室壁性激光心肌血管重建术（TMLR）的基础研究已有较大进展，目前已试用于临床，但其效果不尽人意，争议颇多。特别是TMLR术后激光心肌管道内的形态学结构及其演变规律、血管的再生与重建、TMR的作用机制、治疗效果及临床应用价值等一直存在着较大的争议和相互矛盾，很多基础性问题尚未解决，基础研究明显滞后于临床应用。随着近年来分子生物学的迅猛发展和基因工程技术的日益成熟，为TMR的进一步实验研究和临床应用开辟了一个崭新的前景。有关TMR的实验研究及临床应用，以往均采用单纯性激光打孔方法，本课题在进行激光TMR的同时，又创建了机械性TMR方法，并在两者的心肌管道内应用了血管内皮细胞生长因子（VEGF）及VEGFcDNA质粒，促进了管道内新生血管的形成，并减轻了管道纤维化的程度。从而为探讨TMR管道内血管生成的形态学依据及其作用机制，为TMR的临床应用提供形态学实验基础和技术准备。 材料和方法1．采用成年家兔30只，为A组。利用CO2激光照射心脏的左室前壁，形成透室壁性激光心肌管道。应用组织学方法于术后不同时期观察管道内血管及纤维结缔组织的形成等形态结构的变化，以及管道内组织学和病理学的演变规律。2．采用成年家兔24只，为B组。利用空心钻头在左室前壁施行机械性TMR，术后不同时期与A组进行组织学对照观察。对比两组管道内新生血管的数量、密度及管道最终纤维化的宽度等形态结构，以便寻求TMR的最佳方法。3．采用成年家兔 40只，其中 20只为 C组一另 20只为 D组。两组分别进行激光TMR和机械TMR的同时，在两组的心肌管道内均注射血管内皮细胞生长因于（VEGF）。术后不同时期对照观察 VEGF对两组管道内血管生成的促进作用，包括乙D两组之间和C、D与A、B两组之间的组织学对照观察。同时对照观察管道内纤维化程度等形态结构的变化。寻求结合分子生物学技术来促进心肌管道内血管再生与重建的、更为有效的综合性TMR技术和方法。4．采用成年家兔24只，为E组。进行机械TMR，同时向机械性心肌管道内注射VEGFCDNA质粒。术后不同时期与A、B、C、D各组进行组织学对照观察。通过新生血管数量。密度及其它形态结构等，观察质粒表达后对管道内血管生成的促进作用及管道纤维化程度的影响。为TMR结合基因治疗提供形态学实验基础。 结 果1．激光TMR术后数秒至数十秒内，激光心肌管道便因凝血而闭塞。随后管道内的血凝块机化，形成了许多新生的毛细血管，并逐渐演变为管径较大的小血管。术后不同时期，管道内新生小血管的数量和密度均不同，术后2周为7．23土0．48条／10X4倍，术后4周为4．92土0．24条／10X4倍，术后6《周为2．22t0．33条八0X4倍。各期之间的血管数量。密度均具有极其显著性差异（P＜0．0001），术后2周是管道内小血管形成的高峰期。2周后，随着纤维结缔组织的增生，管道内小血管逐渐萎陷、闭合、消失，激光心肌管道最后以纤维性瘀痕愈合。术后6E周激光心肌管道纤维化的宽度为 1．73士 0．05mm，恰好等于原始激光心肌管道与管道周围热损伤带的宽度之和。2．机械性TMR术后数十秒，管道同样因凝血而闭塞。同激光TMR组相似，机械性心肌管道同样经历了凝血、机化及纤维化等病理性修复过程，但在机化的过程中机械性心肌管道内新生血管的数量较多、密度较高。术后2周为8．41 to．59条／10X4倍，术后6－8周为3．31士0．57条／10X 4倍，与同期的激光 TMR组相比均具有显著性差异mm．of)；术后6E周，机械性心肌管道纤维化的宽度为 0．67土 0．03turn，且纤维化仅局限于原始的机械性管道内，未侵及管道周围的心肌组织，与同期的激光 －2－组相比，具有极其显著性差异O＜0．0001)。3．TMR管道内应用血管内皮细胞生长因子（VEGF）后。血管生成的数量和密度明显增加。术后2周，檄光组和机械组分别为17．84土0．25条八0X4倍和24．20士0．98条八0X4倍；术后6－8周，则分别为8．93士0．24条八0 x 4倍禾11．08士0．96条／OX 4倍。不仅应用VBGF的两组之间具有显著性差异叩m．01人而且应用VEGF－的两组与同期未应用VmF的单纯性WR各组之间更具有极其显著性差异仔州．0001人应用VEGF术后6E周，激光管道和机械管道纤维化的宽度分别为1．66土0．04＿n和 0．66土 0．04M，两组仍具极其显著性差异（P（．001）。4．机械TMR管道内注射V肛FCDNA质粒后，管道内血管的生成有所增加。术后2周，新生血管的密度为12，46士0．49条八OX4倍；术后6干周为6．13土0．24条／10X4倍。与同期的单纯性mR组（A组或B组）和管道内直接应用V队F组K组或D组）相比，均具有极其显著性差异性（P＜0．0001）。术后6－8周，管道纤维化的宽度为0．69士0．03mm，与同期单纯性机械WR组闭组)和应用 VmF的机械wR组（D组）相比，没有差异。 结 论1．激光T