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本工作合成了新的核酸分子“光开关”[Ru(dppx)2bipy]2+(dppx为7,8’—二甲基二吡啶并[3,2-a:2’,3’—c]吩嗪;bipy为2,2—联吡啶),研究了它在核酸分析中的应用和作用机理。主要研究内容如下:
1、综述了几类荧光探针的结构、性质、应用、局限性和前景。
2、合成了一种新型核酸分子“光开关”[Ru(dppx)2bipy]2+,并采用了元素分析、质谱和1H核磁共振进行表征。
3、研究了探针在小牛胸腺DNA、变性小牛胸腺DNA、酵母RNA和寡聚核苷酸检测中的应用。实验结果表明,探针具备分子“光开关”的特性,在小牛胸腺DNA等核酸分子检测中具有很高的灵敏度,可以用来测定3.37 ng/mL~1.0μg/mL小牛胸腺DNA、0.2μg/mL~1.4μg/mL酵母RNA、0.3μg/mL~0.6μg/mL变性小牛胸腺DNA、2.34×10-11 mol/L~1.52×10-7 mol/L寡聚核苷酸d(A)20、9.60×10-12mol/L~1.52×10-7 mol/L寡聚核苷酸d(T)20和1.73×10-11 mol/L~152×10-7 mol/L互补核苷酸d(A)20·d(T)20,它们的检测限分别为3.37ng/mL、2.27 ng/mL、1.22 ng/mL、2.34×10-11 mol/L、9.60×10-12 mol/L和1.73×10-11 mol/L。同时实验还发现,此探针不但可以检测双链核酸分子,还可以检测单链核酸分子。实验还进行了探针检测DNA的机理研究。机理表明,探针在双链结构的核酸检测中,主要是插入结合作用发射荧光,而在单链核酸检测中的机理还有待证明。