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研究目的:从蛋白质组学整体的角度,探讨30km长跑运动对尿液蛋白质组图谱差异性表达的影响及规律,望能筛选出尿液中对评定运动负荷(强度、量)及身体机能具有重要意义的目标蛋白质,分析其功能及特点,为运动训练监控寻找一种无创、系统化的评价方法提供新的实验借鉴和理论依据。 研究方法:本研究以参加2011年全国绿道长跑挑战赛的10名男子为研究对象,运动项目为男子30km。运动全程佩戴SUUNTO心率表,分别留取其运动前(晨)、后尿液以及血液样本进行相关指标的测定,应用双向凝胶电泳确立运动前后尿液蛋白质组的差异性表达图谱,选取运动前后差异性表达量上调≥5倍和新增的蛋白点10个,用基质辅助激光解吸附电离串联飞行时间质谱仪进行质谱鉴定。 研究结果:(1)30km跑后,与运动前相比,受试者的血乳酸、血尿素、血清肌酸激酶浓度均升高,体重与血糖下降,除血糖无统计学意义外,其余各指标均具有非常显著性差异(P<0.01);运动过程中平均心率达165bpm。(2)30km长跑运动后,与运动前相比,尿总蛋白、白蛋白有非常显著性增加(P<0.01),β2-MG具有显著性增加(P<0.05)。(3)30km长跑运动后,与运动前相比,血清肾素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮浓度均增加,肾素有非常显著性差异(P<0.01),血管紧张素Ⅱ有显著性差异(P<0.05),醛固酮无统计学意义。(4)30km长跑运动前、后平均检测到蛋白质点1011±243和1737±15个,共获得差异性表达蛋白点110个,上调与下调各55个。其中运动后上调≥5的蛋白质点10个,新增点23个;运动后下调≥5的蛋白质点18个,消失点6个。对目标蛋白进行质谱分析,共鉴定出6个蛋白点,它们分别是锌α2-糖蛋白、白蛋白、维生素 D结合蛋白、前列腺特异性抗原、β-肌动蛋白和本斯-琼斯蛋白。 结论:(1)30km跑后,血清肾素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮应激反应明显,肾素、血管紧张素Ⅱ活性显著升高,其对肾脏功能的影响机制需进一步探讨。(2)30km运动前后,尿液蛋白质图谱发生了明显的差异性变化,共获差异蛋白点110个,目标蛋白经质谱鉴定分别为:锌α2-糖蛋白、白蛋白、维生素 D结合蛋白、前列腺特异性抗原、β-肌动蛋白和本斯-琼斯蛋白,这些蛋白与机体能量代谢方式的转变、物质的转运、应激保护有关。(3)鉴定出的目标蛋白中,尿液维生素 D结合蛋白、β-肌动蛋白“新增”,可能是由肾细胞膜通透性增大引起,其在体育领域中的研究尚未展开,这为进一步深入研究运动性蛋白尿及其在运动训练监控中具有运动应激特点的目标蛋白质提供新的思路与方向。