【摘 要】
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磷酸甘油酸变位酶1（Phosphoglycerate Mutase 1,PGAM1）是一种参与糖酵解过程的关键酶,可以通过将3-磷酸甘油酸转变为2-磷酸甘油酸促进糖酵解。PGAM1在调节能量产生和核苷酸生物合成等多种细胞活动中发挥关键作用。PGAM1在包括肺癌、骨肉瘤和胰腺癌在内的多种癌症中高表达,并起到促进细胞增殖活性、迁移和侵袭的作用。目前,PGAM1在肺血管疾病中的作用尚不清楚。为探究PGA
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磷酸甘油酸变位酶1（Phosphoglycerate Mutase 1,PGAM1）是一种参与糖酵解过程的关键酶,可以通过将3-磷酸甘油酸转变为2-磷酸甘油酸促进糖酵解。PGAM1在调节能量产生和核苷酸生物合成等多种细胞活动中发挥关键作用。PGAM1在包括肺癌、骨肉瘤和胰腺癌在内的多种癌症中高表达,并起到促进细胞增殖活性、迁移和侵袭的作用。目前,PGAM1在肺血管疾病中的作用尚不清楚。为探究PGAM1在肺动脉高压（Pulmonary Hypertension,PH）中的作用与调节机制,本课题研究了PGAM1在PH动物模型中的表达、PGAM1对肺动脉平滑肌细胞增殖的调节作用、PGAM1对肺血管内皮细胞内皮-间充质转化的调节作用及低氧诱导因子（Hypoxic-inducible factor,HIF）对PGAM1的调控作用研究,取得以下结果:（1）PGAM1/2在PH动物模型中的表达检测:建立HPH、MCT-PH、Su Hx-PH动物模型,通过Western Blot、q-PCR及免疫荧光检测PGAM1/2在动物模型肺组织中表达与分布。结果表明PGAM1在动物模型中的蛋白与m RNA表达水平高于对照组,而PGAM1在对照组中与PGAM2无明显差异。（2）PGAM1对肺动脉平滑肌细胞增殖的调节作用研究:通过Western Blot,Ed U试验,探究敲低PGAM1及PGAM1抑制剂PGMI-004A对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的调节作用,结果表明在常氧和低氧抑制PGAM1均可以抑制肺动脉平滑肌细胞增殖。（3）PGAM1对肺血管内皮细胞内皮-间充质转化的调节作用研究:通过TGF-β诱导大鼠肺动脉内皮细胞发生内皮-间充质转化,蛋白质免疫印迹及免疫荧光检测间充质标志物表达变化,结果表明抑制PGAM1可有效抑制转化生长因子β（Transforming growth factorβ,TGF-β）诱导的内皮细胞向间充质细胞转化。（4）低氧诱导因子对PGAM1的调控作用研究:通过Western Blot、q-PCR、双荧光素酶报告的方法,检测使用低氧和DMOG处理肺动脉平滑肌细胞与肺动脉内皮细胞中的PGAM1表达及HIF对PGAM1的转录调控作用,结果表明在常氧条件下激活HIF可上调PGAM1的表达,HIF可与PGAM1启动子区低氧反应原件结合发挥转录调控作用。
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