PICC联合5-FU诱导人脐静脉内皮细胞损伤的研究

来源 :新疆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yangbao_2002
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目的:探讨经外周静脉置入中心静脉导管(peripherally inserted central catheter,PICC)留置、5-FU刺激对人脐静脉内皮细胞(EA.HY926)损伤的机制。方法:1.使用无菌PICC导管,将其裁制成合适的长度,放入EA.HY926细胞培养液中,加入5-FU药液使其终浓度为40ug/mL共同培养EA.HY926细胞,构建PICC留置、5-FU刺激诱导的人脐静脉内皮细胞损伤模型。2.MTT法分别检测对照组、各模型组(PICC损伤组、5-FU损伤组、PICC联合5-FU损伤组)不同时相点EA.HY926细胞活性的变化。3.划痕实验法检测对照组及各模型组不同时相点EA.HY926细胞迁移率的改变。4.ELISA实验法检测对照组及各模型组EA.HY926细胞培养上清液中炎症相关因子vWF、IL-6、FIB的表达水平。5.Western-Blotting实验法检测对照组及各模型组EA.HY926细胞内vWF、IL-6、FIB蛋白的表达水平。结果:1.与对照组相比,各模型组培养30min、60min、120 min后细胞活性降低,差异有统计学意义(P<0.05),其中以模拟PICC联合5-FU损伤组细胞活性最低。2.各组细胞迁移能力比较:PICC损伤组、5-FU药物损伤组、PICC联合5-FU损伤组、对照组的细胞迁移率分别为51.72%、21.57%、18.24%、75.94%,各模型组细胞迁移率均较对照组下降,差异有统计学意义(P<0.05),其中以模拟PICC联合5-FU损伤组细胞迁移率最低。3.在诱导第30min时与对照组比较,各模型组细胞培养上清液中vWF的浓度均升高,差异有统计学意义(P<0.05);诱导第30min、60min、120min各模型组IL-6、FIB的浓度与对照组比较均升高,差异有统计学意义(P<0.05),并以模拟PICC联合5-FU损伤组IL-6、FIB浓度的升高最为显著。4.诱导24h后,各模型组vWF、IL-6、FIB蛋白的表达水平与对照组比较均升高,差异有统计学意义(P<0.05),其中以模拟PICC联合5-FU损伤组vWF、IL-6、FIB蛋白的表达水平最为显著。结论:PICC置管联合5-FU能够损伤人脐静脉内皮细胞,降低细胞活性,抑制细胞迁移,通过释放vWF引起细胞损伤,炎症因子IL-6和凝血因子FIB浓度的变化在一定程度上反映了PICC留置、5-FU刺激对EA.HY926细胞损伤后的炎症反应,为今后进一步探讨PICC留置联合5-FU致血管损伤的机制提供参考。
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