MRSA在糖尿病足感染中的地位及其致病基因研究

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目的:1.研究感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的糖尿病足(DF)患者的临床特点。2.通过与ICU患者痰标本分离的MRSA进行对比,分析源于糖尿病足感染(DFI)创面的MRSA菌株的耐药性、致病基因、SCCmec分型及其同源性。方法:根据患者入院48h内及抗感染治疗后创面细菌分离培养结果,将2005年6月至2008年5月在天津代谢病医院住院的102例DFI患者分为4组:A组(16例):入院后48h内MRSA阳性;B组(25例):入院后48h内甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)阳性;C组(27例):入院后48h内为革兰阴性菌,经抗感染治疗后MRSA阳性;D组(34例):入院后48h内为革兰阴性菌,住院期间始终未分离出MRSA菌株。A组与B组,C组与D组分别进行比较,研究MRSA产生的高危因素以及对患者住院时间、住院费用、预后的影响。经药敏试验对2007年6月至2008年5月DFI患者和ICU患者分离的菌株进行MRSA筛选,并分析其耐药性。应用聚合酶链反应(PCR)检测上述MRSA的mecA,并对mecA阳性的菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)和SCCmec分型;检测杀白细胞毒素超家族中的pvl和lukE-lukD,荚膜多糖(CP)基因群中的5型(cap5)及8型(cap8)。结果:3年中经药敏试验筛选出43株MRSA,16株为患者入院后48h内分离培养所得(A组),余者(c组)48h内分离出革兰阴性菌,经三代头孢/舒萨林/硫酸依替米星交替治疗平均2个月后分离出MRSA菌株。A、B组间WBC、RBC、ALB和DF溃疡面积差异有统计学意义(P<0.05);C、D组间DM病程和双下肢动脉最大狭窄率(SR)差异有统计学意义(P<0.05);源自DFI和ICU患者的MRSA对庆大霉素/环丙沙星/红霉素/四环素耐药率均为100%。DFI患者和ICU患者中分别筛选出13株MRSA,其mecA阳性率分别为92.3%(12/13)和100%(13/13)。对mecA阳性MRSA的进一步研究表明:两组lukE-lukD及pvl阳性率分别为100%(12/12)及0%(0/12);DFI组SCCmecⅢ型和SCCmecⅣa型各占6株(50%);CP基因以5型和8型为主(11/12,91.7%),其中4株为cap5(33.3%),7株为cap8(58.3%);ICU组SCCmecⅢ型占10株(76.9%),SCCmecⅣa型占3株(23.1%),CP基因以5型和8型为主(8/13,61.5%),其中1株为cap5(1/13,7.7%),7株为cap8(7/13,53.8%);12株DFI组和6株ICU组的MRSA经PFGE分析显示以A1型为主((16/18,88.9%)),B1型和A2型各占1株。结论:DFI和ICU分离的MRSA多重耐药现象普遍存在;与MSSA比较,MRSA阳性DFI患者全身炎症反应更明显。MRSA同源性很强,表明天津市2007年6月至2008年5月可能存在A型克隆株MRSA的暴发流行。SCCmecⅣa型在DFI创面分离的MRSA中比例较高,可能提示社区获得性MRSA(CA-MRSA)已成为DFI的主要致病菌;DFI创面分离的MRSA菌株均携带lukE-lukD,而lukE-lukD对白细胞杀伤力较pvl弱,这也许是造成DFI局部炎症反应不典型的原因之一;91.7%MRSA菌株携带cap5/8,这可能为人们以血清5/8型CP为抗原进行免疫治疗的研制带来希望。MRSA致病基因特点在DFI和ICU患者间无明显差异。
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