农杆菌介导的月见草△6-脂肪酸脱氢酶基因转化亚麻的研究

来源 :内蒙古大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:sophia_hou
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本研究采用农杆菌介导的方法,将本实验室克隆得到的月见草△6-脂肪酸脱氢酶基因转化亚麻,为在转基因亚麻中增加γ-亚麻酸含量奠定了基础。主要结果如下:   1)首先较系统地研究并确立了亚麻组织培养再生体系。本研究通过不同外植体的选择及不同激素浓度组合等影响植株再生的因素进行了优化。结果表明亚麻植株再生最适宜的外植体为下胚轴及子叶节;亚麻不定芽诱导率最高的激素配比为0.2mg/L IAA+0.5 mg/L6-BA;亚麻不定芽最适生根培养基的激素配比为0.03mg/L IBA+0.07mg/L NAA。   2)对农杆菌遗传转化亚麻体系进行了优化。在已建立的亚麻组织培养再生体系的基础上,研究并优化了根癌农杆菌介导的亚麻遗传转化体系。对影响根癌农杆菌转化的因子:预培养时间、共培养时间、农杆菌侵染浓度、农杆菌侵染时间等进行了优化,确定了下胚轴及子叶节的最佳预培养时间分别为2d和0d,最佳共培养时间为2d和5d,最佳农杆菌侵染浓度为OD600=0.5~0.6和0.8~1.5,最适侵染时间为5 min和30 min。   3)获得的再生转化植株经PCR检测,结果证明目的基因已转化到亚麻基因组中。
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