糖尿病是一组以高血糖和糖尿为特征的代谢性疾病。糖尿病患者长期存在的高血糖症状会导致各种组织,特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害及功能障碍。根据ADA(美国糖尿病协会)的数据,中国有1.14亿糖尿病患者和1.4亿糖尿病前期人群。1.14亿,接近于中国成年人总数的十分之一,这个数字同样占据了全球糖尿病患者总人数的三分之一。自1969年Rahbar首次发现糖尿病患者的糖化血红蛋白升高,在余后的四十余年中,糖化血红蛋白(HbA1c)逐渐成为糖尿病诊断和治疗中的一个不可或缺的监测指标。目前,临床上检测糖化血红蛋白的多种方法无法同时满足床旁诊断(POCT)的需求和准确性的要求。因此,需要一种快速且准确的针对HbA1c的检测方法。本论文主要研究内容如下:(1)根据硼酸亲和层析柱法检测糖化血红蛋白的原理,设计并构建了一种在侧向层析试纸上的亲和层析探针。以牛血清白蛋白(BSA)为载体,通过交联的方法将3-氨基苯硼酸与BSA偶联,构建糖化血红蛋白亲和层析探针。以亲和层析探针作为层析试纸中的检测线,根据检测线上糖化血红蛋白的颜色进行半定量检测。硼酸亲和层析试纸可以区分4.7%~9.7%的HbA1c全血样本,且检测结果一致性较好。(2)以羧基聚苯乙烯微球为原料,通过溶胀、化学偶联、静电吸附等方法,制备荧光微球,包覆核心链霉亲和素并偶联抗体,制备出一种稳定、荧光信号强的荧光免疫微球。根据荧光免疫层析法的基本原理,以该荧光免疫微球为载体,组装并构建荧光免疫层析试纸条,利用荧光免疫定量分析仪进行定量检测。糖化血红蛋白荧光免疫层析试纸保证了良好的检测准确度、线性度(R~2>0.97)、变异系数(CV<10%)和区分度,并且和临床比对结果十分优异(R~2>0.95)。(3)构建了一种新型侧向层析试纸,基于夹心法,综合了亲和层析柱法和荧光免疫层析法的优势,同时保证了检测时间在30min左右,满足POCT的要求。相比于亲和层析法中依靠血红蛋白的颜色作为检测结果,该试纸以荧光定量信号为结果可以提升准确度并减少干扰。相较于荧光免疫层析试纸,荧光亲和免疫层析试纸有较大的线性区间(3.0%~13.8%),线性相关好(R~2>0.99),减小了糖化血红蛋白前体的影响且节约了所需HbA1c特异性抗体对的成本。不仅如此,试纸保证了良好的准确度(CV<15%)和在糖化血红蛋白cutoff值(6.5%)处的区分度。在与临床样本的比对验证中,荧光亲和免疫层析试纸依旧展现了良好的一致性(R~2>0.95)。