第一部分供心常温血连续灌注全程不停跳心脏移植模型的建立目的：在前期的研究中,我们对温血灌注心脏不停跳保存的效果进行了研究。为了避免在摘取供心以及移植过程中心脏停搏和心肌缺血,我们应用了常温血连续灌注供心保存技术,探讨从供心的获取到供心移植完毕全程保持供心在不停跳状态的可行性和评价该方法对长时间保存的供心的心肌保护效果。方法：32只巴马小型猪随机分为两组：不停跳保存组,8对,分别为供体和受体,供心采用常温血连血灌注不停跳保存8小时后供心在不停跳状态下进行心脏移植；冷保存组,8对,分别为供体和受体,供心应用HTK保存液(histidine-tryptophan-ketoglutarate solution)灌停后放入4℃HTK液中保存8小时后供心在低温停搏下行心脏移植。记录在移植中心律失常的发生例数、心脏移植吻合和体外循环的时间,以及移植后血管活性药物的应用剂量；检测主动脉开放2小时和3小时的左心室血流动力学变化和主动脉开放3小时后血清CK-MB水平和心输出量；取左心室心肌标本进行心肌超微结构观察。结果：不停跳保存组的心脏移植吻合时间长于冷保存组,且有显著性差异；但体外循环时间明显少于冷保存组；不停跳保存组的心律失常发生率、血管活性药物的使用剂量以及血清水平的CK-MB均明显低于冷保存组；在主动脉开放2小时和3小时后不停跳保存组供心左心室血流动力学参数：左心室收缩压(LVDP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室内压最大上升(+dp/dtmax)和下降速率(-dp/dtmax)均明显优于冷保存组,且显示出较快的恢复趋势。心肌超微结构显示不停跳组在肌小节的清晰度和线粒体的完整度及线粒体嵴的完好度,以及肌膜的水肿程度均明显优于冷保存组。结论：常温连续灌注全程不停跳保存供心是完全可行的,该模型适用于供心连续灌注长时间不停跳保存和实施不停跳心脏移植。该方法可避免缺血再灌注损伤,是一种更接近生理的有效的心肌保护方法。第二部分常温灌注全程不停跳保存供心功能、代谢和心肌凋亡的研究目的：研究长时间常温连续灌注不停跳保存供心移植后心功能、心肌代谢和心肌细胞凋亡变化,检验该保存方法的心肌保护效果。方法：广西巴马小型猪12对,按随机数字表法分为：A组和B组,每组各6对,分为供体和受体。A组供心在顺行连续灌注不停跳状态下切取,应用37℃氧合血连续灌注不停跳保存8小时后在不停跳状态下完成移植手术。B组供心应用ST.Thomas停搏液灌停后,应用29℃高钾氧合血连续灌注保存8小时,在停跳连续灌注下完成移植手术。检测两组供心保存期0.5小时,4小时和8小时的心肌氧摄取率、血清CK-MB和cTn-I变化；移植3小时后检测两组供心左心室血流动力学、心肌含水量、心肌组织光镜下改变、心肌丙二醛和ATP含量、心肌细胞原位凋亡和流式细胞学变化。结果：A组在保存0.5h、4h和8h时的心肌氧摄取率均明显大于B组,两组供心随着保存时间的延长血清水平CK-MB(?)cTn-I均有升高,两组间无明显差异：主动脉开放后两组供心恢复/保持窦性心律例数和成功脱离体外循环例数无明显差别；移植3小时后,A组左心室收缩和舒张功能恢复好于B组；A组心肌含水量略少于A组,光镜显示B组心肌水肿较A组明显；A组的心肌组织的ATP含量明显高于B组；A组的心肌丙二醛含量和心肌细胞凋亡程度明显低于B组。结论：常温连续灌注不停跳保存方法可以长时间有效地保护供心的心功能,改善心肌代谢水平,减少心肌凋亡。第三部分红细胞压积和钠离子浓度对不停跳供心保存效果的影响目的研究常温血灌注液红细胞压积和钠离子浓度对长时间不停跳供心保存效果的影响。方法广西巴马小型猪12只,供心在常温血连续灌注不停跳状态下切取不停跳保存8小时。根据灌注液红细胞压积和钠离子的浓度不同分为分为A组(n=6)和B组(n=6)。记录两组供心保存期间的心率和心律变化等情况,检测两组心肌保存4小时和8小时的左心室动力学变化,以及保存8小时后心肌含水量和心肌超微结构改变。结果(1)两组供心在保存期间心率和心律变化无明显差异；(2)左心室动力学在供心保存在第4h两组无明显差异,在第8h有明显差异(P<0.05)；(3)保存8h后心肌含水量A组少于B组(P<0.05)(4)心肌超微结构显示A组的肌膜水肿程度低和线粒体结构的完整性好于B组。结论适当提高灌注液中的红细胞压积和钠离子浓度可以降低不停跳供心的水肿程度,保护供心的心功能。