几种园艺植物病毒检测技术研究

来源 :东北林业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuwei800
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
园艺植物是一类供人类食用或观赏的植物。园艺植物病毒是严重影响园艺生产的重要因素之一。为了进一步控制病毒危害,本研究旨在建立从园艺植物辣椒、苹果、樱桃中分离dsRNA或总RNA的方法,并应用琼脂糖凝胶电泳、RT-PCR技术、免疫捕获PCR技术等方法对分离的核酸进行鉴定,从而建立可有效检测病毒的技术体系。此外,还分别针对不同试材(如叶片、辣椒制品、种子)中的病毒进行了检测,并对辣椒病毒的灭活进行了初步探索。  1、对辣椒病毒dsRNA的提取进行优化,建立了成熟的提取辣椒病毒dsRNA的技术体系,通过琼脂糖凝胶电泳获得了特异的dsRNA片段。分别采用双酶解方法和DNA凝胶回收试剂盒对dsRNA谱带进行纯化,经比较采用DNA凝胶回收试剂盒回收dsRNA谱带比双酶解法更好,可有效获得单一的dsRNA片段。  2、利用改进的CTAB法提取辣椒制品中的总RNA,并建立RT-PCR技术检测辣椒轻斑驳病毒的技术体系。对辣椒制品(辣椒酱、咸菜、辣椒粉)中的辣椒轻斑驳病毒进行检测,在一些辣椒制品中检测到了辣椒轻斑驳病毒,说明辣椒轻斑驳病毒较难以被破坏。将辣椒制品中的辣椒轻斑驳病毒经摩擦接种转移至烟草,可在烟草上显示明显病毒侵染症状,并进一步经RT-PCR证实。从而说明辣椒制品中含有的辣椒轻斑驳病毒可有效传播及增殖。已有报道显示辣椒轻斑驳病毒可能侵染人体并引起一系列的反应,因而食品中的辣椒轻斑驳病毒也需要被密切关注。  3、利用RT-PCR技术,对北京、沈阳、哈尔滨三地的商品辣椒种子中的辣椒轻斑驳病毒的带毒率进行了分析,结果显示40种种子中,共有15种种子被辣椒轻斑驳病毒感染,说明当前该病毒的危害及传播已较严重。  4、利用高温干热处理对辣椒种子内的辣椒轻斑驳病毒进行了灭活处理,结果显示,70℃处理未见明显灭活效果,75℃处理48h可灭活70%的病毒,且对种子的发芽率影响相对较小。该技术体系具有一定的应用潜力。  5、利用RT-PCR技术对苹果病毒进行了检测,建立了对3种苹果病毒的检测技术体系。对一些苹果、毛樱桃、杏样本进行了检测,结果显示不同样本中3种病毒侵染率皆较高,且存在较多混合侵染的现象。  6、基于RT-PCR技术的假阴性及假阳性、血清学技术的灵敏性差问题,探索建立病毒的IC-RT-PCR检测技术体系。分别以辣椒轻斑驳病毒和苹果茎痘病毒为试材,利用病毒特异抗血清包被薄壁管,捕捉感病叶片粗汁液中的病毒粒子,之后运用RT-PCR方法对捕捉的病毒进行特异性扩增,最终建立了可稳定检测辣椒轻斑驳病毒和苹果茎痘病毒的技术体系。
其他文献
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
摘 要: 教师开展课堂教学需要有效地利用各种课堂教学资源,所以课堂教学资源是教学活动的主要支持因素和基本条件,扮演着重要的角色。如果教师对于课堂资源认识不够,开发不够,那么教学活动就失去了一定程度的依托和凭借,也无从谈起有效的课堂。本文以高中地理课程为例,来探讨课堂资源的开发和应用问题。  关键词: 高中地理 课堂教学资源 开发应用    一、课堂教学资源未被加以重视  (一)物力资源不能充分被利
非智力因素是有利于人们进行包括学习活动在内的各种活动的智力因素以外的全部心理因素的总称。从形态上讲,它是由动机、兴趣、情感、意志、性格等因素所组成,同时每个人的个性水平也是不尽相同的。  21世纪教育的目的不仅仅是向学生传授知识技能、培养能力、渗透德育,还注重学生健全人格的形成与发展。中学生虽有强烈的好奇心和求知欲,但还不够成熟,缺乏明确的方向和目的,充分挖掘学生的非智力因素显得尤为重要,因此我在
兴趣是学习的第一动力,在中学思想政治学习过程中,应通过多种途径和方式培养学生对思想政治学习的兴趣,充分调动学生学习的主动性和积极性,使学生积极主动地投入到思想政治的
摘 要: 在新课程理念的指导下,初中思想品德课堂教学改革开展得如火如荼,互动教学是初中思想品德课堂中最常见的教学方式,是教学目标得以实现的重要手段,但其间也暴露出一些不容忽视的问题。文章作者针对目前的初中思想品德课堂“互动”教学存在的问题进行思考,并提出建议。  关键词: 初中思想品德 “互动”教学 思考    “互动”教学方式是课堂教学最基本的组织形式,是提高课堂效率、达成教学最优化的有效途径之
在新一轮课程改革的推动下,思想品德课程发生了一系列深刻的变化,为了消除思想品德课为了应试而教、为应试而学的倾向,切实实施素质教育,“活动化”的教学策略正被广大教师所采用。所谓“活动化教学策略”是指在教师的指导与组织下以学生主体参与、自主活动、积极探究、自我感悟为特点,以促进学生认知、情感、行为、个性等全面和谐发展为目的的教学形式。在教学中如果学生缺乏主动精神,主体作用得不到充分发挥,就会制约教学的
白血病是一种严重危害人类健康的恶性肿瘤疾病,每年全世界有数十万人患此疾病。白血病的治疗方式主要以传统的放化疗,诱导治疗以及骨髓移植为主要方式,但是每种方式都有自己的局
摘 要: 新课程高考进行了很多改革,虽不是全面、彻底的改革,但是新课程高考在相当层面上是符合新课程理念的,是对学生综合能力的考查。本文分析了素质与素质教育的内涵,并对在高中物理教学中渗透素质教育的要点与教学过程进行了探讨。  关键词: 高中物理教学 素质教育 教学过程    在推进高中新课程的过程中,很多人认为高考不改,新课程就无法真正实施,高中教学仍然会是应试教育。新课程高考进行了很多改革,但还
今年年底,全国美术界即将迎来第八次全国美术家代表大会。在大会即将召开之际,认真回顾和梳理5年来中国美术的发展道路,对于继续推进中国美术的繁荣发展具有重要意义。为推进
摘 要: 课堂提问,作为政治课堂教学中的至关重要的方法,同时还是一种很重要的交际手段。提问对启发和推动学生积极思维,促进和加深理解知识,培养良好的思维品质具有十分重要的作用。提问有很多讲究,在课堂教学中,培养学生的问题意识,正确运用提问技能能更好地提高课堂教学效果。  关键词: 高中政治教学 有效提问 问题意识    有效的课堂提问能激起学生兴趣,吸引学生注意力;能及时发现并检测学生学习中存在的问