血管内皮生长因子(Vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)是1989年Ferrara等在牛垂体虑泡星状细胞体外培养液中首先纯化出来的一类糖蛋白，在血浆中以同源二聚体的形式存在。VEGF是一高独特的血管内皮细胞有丝分裂素，具有强烈的促内皮细胞增值作用，并促进新生血管的形成，也是一种有效的血管通透性诱导因子，可增加血管通透性以及血管维持功能。 VEGF是胱氨酸结生长因子超家族的一员。人类VEGF基因位于6号染色体长臂，全长14Kb，有8个外显子和7个内含子，可合成VEGF121、VEGF165、VEGF183、VEGF189和VEGF206六个异构体，其结构与功能密切相关。VEGF基因还存在多个位点的单核苷酸多态性，如：-2587C/A、-1455T/C、-1154G/A、-1001G/C、-7C/T、1612G/A、936C/T、702C/T、-460T/C和405G/C等。 单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism，SNP)是指基因组内特定核苷酸位置上可出现两种或两种以上不同的碱基，且任何一种在群体中的频率分布均不少于1％。随着人类基因组计划的展开，已经发现人类基因组SNP的差异是人类种族和个体差异、不同人群的疾病易感性或耐受性以及对治疗和环境因素的反应出现差异的分子基础，因而SNP的研究对人类起源及进化、疾病的诊断、预防和治疗有着重要意义。 脑梗死是危害人类健康的主要病种之一，也是人群中死亡的重要原因，直到现在这一疾病尚未能很好了解和控制。其发病与环境因素密切相关，同时也是一个多基因遗传性疾病。VEGF由于剪接方式不同可形成多种表达产物。在此基因内存在多个单核苷酸多态性位点，其中在启动子5’-末端非翻译区域的-460T/C、+405G/C和3’-末端的+936C/T与RNA的剪接有关，并对多种与血管发生相关的疾病(如糖尿病视网膜病、慢性阻塞性肺病、多种肿瘤)有影响。VEGF通过多种机制在脑梗死发病过程中起作用。有研究表明：脑梗死后在脑缺血区的VEGFmRNA表达增多，导致VEGF浓度增高，从而对缺血区的脑细胞有保护作用。目前国内外的研究主要是针对血管内皮生长因子与缺血性疾病的关系和治疗缺血性疾病的可行性及相关性技术进行探讨。我们选择VEGF936C/T、405G/C、-460T/C单核苷酸多态性位点为研究对象，调查VEGF基因多态性与脑梗死及各基因型与脑梗死患者血浆VEGF浓度的联系，目前国内尚未见报道。我们旨在了解三个SNP位点的分布及其与血浆VEGF水平和脑梗死的关联关系，了解不同基因型个体对血浆VEGF水平和脑梗死的遗传易感性的影响，为脑梗死的防治提供科学依据以期从基因水平上了解脑梗死的发病机制，并为人群预防和基因治疗提供理论依据。 方法： 我们选择160例脑梗死组与149例健康体检对照组，脑梗死患者均为住院病人，诊断明确，符合全国第四届脑血管疾病学术会议修订的诊断标准，不包括动脉炎、外伤、血液病、药物、脑血管畸形或动脉瘤所引起的脑梗死。对照组为同期在我院保健科体检的健康志愿者，对照组人群年龄与病例组患者年龄相匹配，排除糖尿病、高血压病、冠心病、慢性阻塞性肺病、肿瘤疾病和脑血管病。 应用病例对照研究与聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR—RFLP)技术相结合的分子流行病学方法，检测VEGF936C/T、405G/C、-460T/C的基因型频率等位基因分布情况，分析VEGF936C/T、405G/C、-460T/C的遗传吻合度，根据限制性片段长度多态性(RFLP)电泳图谱确定基因型。同时检测两组的血浆VEGF浓度，分析VEGF936C/T、405G/C、-460T/C与血浆水平和脑梗死易感性之间的关系。 应用基因计数方法计算出等位基因频率。采用t检验进行样本均数比较。各群体之间等位基因频率的差异及基因型Hardy-Weinberg平衡吻合度采用X2检验。因为血浆VEGF浓度不是正态分布，检验之前先进行对数转换。采用多因素logistic分析方法分析性别、年龄、血压、血浆VEGF水平。 结果： 1.对比两组的临床资料，我们发现两组间性别、血压、血浆VEGF水平有显著性差异(p<0.01)，而年龄无差异。同时采用多因素logistic分析方法分析性别、年龄、血压、血浆VEGF水平，发现两组间血压、血浆VEGF水平是相关因素，而性别、年龄不是相关因素。 2.VEGF936C/T、-460T/C、405G/CSNP与脑梗死的关系对脑梗死组的VEGF936C/T、405G/C、-460T/C位点进行Hardy-Weinberg检验提示符合Hardy-Weinberg平衡。脑梗死组的VEGF936TT+TC基因型频率(66.25)显著高于对照组(33.75)(P<0.01)，而在脑梗死与对照组中，VEGF-460、+405位点的各种基因型分布，G/C、T/C等位基因分布差异无统计学意义；在脑梗死患者中，VEGF936位点上TT+CT的频率显著高于对照组(P<0.01)。而405G/C、-460T/CSNP的基因型频率和等位基因频率分布均无统计学差异(P>0.05)。同时，计算了T936、C-460和C405的患病比值比及95％可信区间，分别为1.855(1.096～3.140)，0.615(0.298～1.271)和1.201(0.717～2.022)，发现带有T936的人群患脑梗死机会比不带T的人群高(p<0.05)。我们还进行高血压分层分析发现，VEGF936TT+CT仍是脑梗死的易感基因型。提示VEGF936TT+CT为脑梗死易感基因型。 3.VEGF936C/T、-460T/C、405G/CSNP与血浆VEGF水平的关系调查两组间的血浆VEGF浓度发现脑梗死组(353±98ng/L)比对照组(310±78ng/L)显著升高(P<0.01)。发现VEGF936C/T与血浆VEGF水平升高有明显相关关系，VEGF405G/CSNP与血浆VEGF水平可能有相关关系，VEGF-460T/CSNP与血浆VEGF水平无相关关系。 结论： 936TT与936CT基因型与脑梗死发病有关，VEGF936C/TSNP与血浆VEGF水平的升高有明显关系，VEGF936C/T可能是脑梗死的潜在遗传标志，对脑梗死的进一步治疗提供了科学基础。-460T/C、+405G/C基因型与脑梗死可能无关。VEGF405G/CSNP与血浆VEGF水平可能有相关关系，VEGF-460T/CSNP与血浆VEGF水平无相关关系。