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我国是世界贝类养殖、加工、消费大国,贝类产量占海水养殖总产量的80%,在加工过程中产生大量的贝类蒸煮液,未经处理直接排入海中,造成了资源的极大浪费和环境污染。本文以菲律宾蛤仔蒸煮液为原料,采用高温加热和低温旋转蒸发的浓缩方式,采取酸沉和醇沉提取粗多糖的方法,并采用DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析柱对粗多糖进行了分离纯化,将分离纯化得到的组分通过高效液相色谱进行了单糖组成分析,研究结果如下:(1)菲律宾蛤仔蒸煮液可溶性固形物含量为1.6%,主要以蛋白质和多糖为主,含量分别为0.57%和0.74%,其中,多糖占可溶性固形物的46.3%。(2)采用木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶对蒸煮液进行酶解,当p H和酶解温度一定时,随着酶量(2.5%,5%,10%,20%)增加和酶解时间(1h、2h、4h、6h)延长,测得的多糖含量与原蒸煮液的结果相近,表明酶解对提高菲律宾蛤仔蒸煮液的多糖含量没有明显效果。(3)蒸煮液经高温浓缩与低温浓缩处理后,采用酸沉后再醇沉的多糖提取方法可以显著提高粗多糖的提取量,较原蒸煮液提取量分别增加了11.1%和14.1%,采取直接醇沉的多糖提取方法则分别增加了10.2%和5.4%。酸沉后再醇沉这一多糖提取方法可以显著增加所提取的粗多糖中的多糖含量,从原蒸煮液、高温浓缩和低温浓缩蒸煮液提取的粗多糖中多糖含量分别为82.5±0.3%、78.8±1.5%和83.3±1.7%,显著高于直接醇沉提取方法(63.5±2.2%、68.5±4.6%和64.7±1.3%),且蛋白含量明显低于直接醇沉提取方法。蒸煮液经浓缩处理后,酸沉、酸沉后再醇沉:两种多糖提取方法的多糖总回收率较原蒸煮液提高了12%;高温浓缩直接醇沉提取的多糖回收率为72.0%,高于低温浓缩的多糖回收率(65.1%)。(4)采用DEAE-Sepharose Fast Flow凝胶柱层析均将不同浓缩方式处理的菲律宾蛤仔蒸煮液粗多糖进行了分离,得到了两个峰,分别命名为峰1和峰2。其中,峰2于1530cm-1附近和1400 cm-1附近存在羧酸基-COOH(C=O非对称伸缩振动和O-H变角振动)吸收峰,峰1则没有,表明峰2含有糖醛酸组分。(5)运用PMP柱前衍生法对低温浓缩直接醇沉(XC)、低温浓缩酸沉后再醇沉(XS)、高温浓缩酸沉后再醇沉(JS)三种方式的多糖组分进行了高效液相色谱分析,结果表明,三种方式处理得到的峰1主要含葡萄糖(Glc),含量分别为89.72%、90.24%和87.36%;峰2主要为葡萄糖(Glc),含量分别为90.60%、81.57%和61.18%,峰2还含有甘露糖(Man)、D-葡萄糖醛酸(Glc UA)、D-(+)-氨基半乳糖盐酸盐(Gal N)、氨基葡萄糖(Glc N)、D-半乳糖(Gal)和L-岩藻糖(Fuc),无D-(+)-半乳糖醛酸(Gal UA)。每种粗多糖中单糖含量最高的都是Glc,含量分别为47.78%、48.14%和54.98%,其次依次是Fuc、Glc N和Glc UA。(6)蒸煮液与每种粗多糖对五种实验菌种均有一定的抑菌性,但是抑菌活性弱;在体外亚硝酸盐清除和NDMA合成阻断实验中,粗多糖JS和XS对Na NO2的清除作用不显著,但对NDMA合成阻断效果显著,最高阻断率达40%。