DiI标记脂蛋白改良法的建立及其在VLDL受体结构与功能关系研究中的应用

来源 :同济医科大学 华中科技大学同济医学院 华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fanybul8899
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建立了脂蛋白DiI标记的改良法.用DiI(1,1-dioctadecyl-3,3,3,3-tetramethylindocarboeyanine perchloate)直接标记第一次超离心后上层混合物(-漂混合物)中的VLDL、LDL或去乳糜微粒(CM)后血浆中的高胆固醇血症兔β-VLDL,再超速离心分离DiI-LDL、DiI-VLDL或DiI-β-VLDL.标记过程中不需要去脂血清(LPDS),超速离心时间大大缩短,标记效率不受影响.为研究VLDL受体结构与功能的关系,探讨VLDL受体配体结合域中八个重复序列对脂蛋白结合的影响.根据中国人VLDL受体基因的cDNA序列构建了一个含缺失I-5重复序列的突变型VLDL受体基因的重组体,将其与含正常VLDL受体基因的重组体PCD-VR同时用脂质体导入CHO细胞,48小时后,观察两种受体结合改良法标记的DiI-β-VLDL的能力,结果显示:缺失1-5重复序列,VLDL受体基本丧失了其功能.
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