【摘 要】
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目的探讨以丝素蛋白为支架以骨髓基质干细胞体外诱导的成骨细胞为种子细胞修复兔桡骨骨缺损的可行性。方法从4～8周龄的新西兰大白兔的左右两侧股骨大转子部抽取骨髓,应用密度
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目的探讨以丝素蛋白为支架以骨髓基质干细胞体外诱导的成骨细胞为种子细胞修复兔桡骨骨缺损的可行性。方法从4～8周龄的新西兰大白兔的左右两侧股骨大转子部抽取骨髓,应用密度梯度离心法和贴壁培养法进行骨髓基质干细胞的分离和纯化。然后再进行体外的培养,扩增和传代,取体外扩增的第二传代细胞向成骨细胞诱导,观察其碱性磷酸酶活性以及细胞矿化作用。取体外诱导分化的第三代成骨细胞制成浓度为2×107个/毫升的细胞悬液接种到丝素蛋白支架上制成细胞载体复合物。将细胞载体复合物植入兔的桡骨骨缺损处,分别于术后4,8,12周取材,进行组织学,X线观察。并按Nilsson等骨愈合组织学评分标准和Lane等骨愈合的X线评分标准进行评分。结果原代培养的骨髓基质干细胞首先形成细胞集落,14天时集落间接近融合;传代细胞体积变大,约5-7天传代一次。诱导条件下碱性磷酸酶活性明显增高,并出现矿化结节。丝素蛋白支架材料孔径在200μm～300μm之间,孔隙率95%,孔隙分布较均匀,孔隙连通性好。抗压强度为40MPa,抗折强度为4.0MPa。组织学染色,X线观察表明:植入细胞—载体复合物组(A组):骨缺损处4周即有骨痂形成,可见大量幼稚骨及骨小梁。随着时间的推移,骨
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