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列当属(Orobanche L.)是列当科(Orobanchaceae)最大的一属,全世界约有140多种。我国25种,主要分布于东北、华北及西北地区。列当(O.coerulescens)、黄花列当(O.pycnostachya)、弯管列当(O.cernua)、毛药列当(O.ombrochares)等数个品种在民间入药,做肉苁蓉的代用品,具有补肾,壮阳、强筋之功效,用于治疗肾虚腰膝冷痛、小儿腹泻、神经官能症等疾病。列当属植物普遍含有苯乙醇苷类成分,药理研究表明该类成分具有抗氧化、抗衰老、保肝、神经保护、改善脑组织循环、增强免疫等作用。 本文采用活性成分跟踪和分离等天然药物研究思路和方法对黄花列当药材进行了系统的植物化学研究,并富集了其中含量较高的几个苯乙醇苷类成分。在化学成分研究的基础上首次建立了HPLC测定列当属植物中苯乙醇苷类成分的含量测定方法,对不同产地的多批次黄花列当、列当和弯管列当样品进行了含量测定研究,为列当属植物的质量控制和开发利用提供科学依据。 利用大孔树脂、硅胶、MCI、SephadexLH-20、制备液相等色谱技术对黄花列当的乙酸乙酯和正丁醇提取部位进行了分离纯化,共得到25个化合物,通过理化性质和现代波谱技术(UV、IR、ESI-MS、1HNMR、13CNMR、1D和2D-NMR谱等鉴定了其中的18个。其中13个为苯乙醇苷类化合物分别为acteoside(化合物1)、isoacteoside(化合物2)、crenatoside(化合物3)、isocrenatoside(化合物4)、decaffeoyl acteoside(化合物5)、descaffeoyl crenatoside(化合物6)、2’-acetyl acetoside(化合物7)、2’-acetyl isocrenatoside(化合物8)、campneosideⅠ(化合物9)、campneosideⅡ(化合物10)、leucosceptoside A(化合物11)、3’-O-methyl crenatoside(化合物12)、3’-O-methyl tubuloside B(化合物13);2个为糖苷类化合物:kankanose(化合物14)、sinapoyl-4-O-β-D-glucopyranoside(化合物15);2个为木脂素类化合物:(+)-syringaresinol-O-β-D-glucopyranoside(化合物16)、(+)-pinoresinol-O-β-D-glucopyranoside(化合物17);1个为黄酮类化合物:apigenin(化合物18)。化合物2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18为首次从本种植物中分离得到;其中化合物5、8、13、14为首次从本属植物中分离得到。 采用等度洗脱的方式,建立了黄花列当中3个苯乙醇苷和列当中2个苯乙醇苷成分的含量测定方法,对色谱条件、药材提取方法进行了优化,经方法学考察,符合含量测定的要求;采用梯度洗脱,以毛蕊花糖苷为内参物,建立了一测多评法测定弯管列当中4个苯乙醇苷含量的方法。验证了一测多评法的适用性及可行性,进行了方法学、方法耐用性以及系统适应性试验的考察,结果证明本试验建立的分析方法简单,快速,各成分相对校正因子重现性良好,一测多评法与外标法测定结果无显著差异,可用于弯管列当的定量分析。 本次研究首次建立了O.pycnostachya和O.coerulescens的含量测定方法,首次建立一测多评法测定O.cernua中苯乙醇苷含量的方法。通过比较内蒙及周边地区多个批次样品中的含量发现黄花列当中含量高的三个成分依次为毛蕊花糖苷、crenatoside、2’-乙酰毛蕊花糖苷;列当中含量高的成分是毛蕊花糖苷和crenatoside,普遍不含2’-乙酰毛蕊花糖苷;弯管列当中含量由高到低依次为毛蕊花糖苷、crenatoside、2’-乙酰毛蕊花糖苷、isocrenatoside。由此推断,列当属植物中普遍含量高的两个成分是毛蕊花糖苷和crenatoside,且这两种成分的含量在黄花列当中普遍高于其他两种列当;2’-乙酰毛蕊花糖苷的在弯管列当中的含量要高于其他两种列当;黄花列当和列当也含有isocrenatoside,但由于含量太低无法达到定量要求(S/N<10),故没有测定。