【摘 要】
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背景:脓毒症是感染引起的全身性炎症反应综合征,目前虽然对脓毒症的诊断和治疗有了很大的进展,但其发病率和病死率仍然居高不下。革兰氏阴性菌是引起脓毒症的主要致病菌。脂多糖
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背景:脓毒症是感染引起的全身性炎症反应综合征,目前虽然对脓毒症的诊断和治疗有了很大的进展,但其发病率和病死率仍然居高不下。革兰氏阴性菌是引起脓毒症的主要致病菌。脂多糖位于革兰氏阴性菌细胞壁的外层,是其主要的致病成分。为了进一步探讨脂多糖的作用机制并找出潜在的治疗靶目标,我们研究了脂多糖的分子结构,发现其是富含阴离子的大分子物质,也就是说在液体状态下脂多糖带有大量的负电荷。那么,能否找到一种富含阳离子的物质,来中和脂多糖所带的负电荷,从而达到削弱或者抑制脂多糖促炎反应的作用呢?由此我们找到了聚乙烯亚胺这种物质,聚乙烯亚胺是富含阳离子的聚合物,具有高反应活性,常用做转染试剂,免疫佐剂,基因疫苗运输工具等。 目的:观察聚乙烯亚胺能否对脂多糖已经引起的炎症反应有一定的抑制作用。 方法:用含10%胎牛血清的高糖培养基培养RAW264.7细胞,选择生长状态良好的细胞,用10ng/ml LPS刺激RAW264.7模拟炎症反应模型。实验分为空白组,LPS组,LPS+PEI组,PEI组,LPS+PEI组在10ng/mlLPS刺激RAW264.710min后加入1μg/ml PEI,然后在2h检测各组细胞内TNF-αmRNA的表达量,4h检测各组上清内TNF-α的浓度。用10ng/mlAlexa-LPS标记RAW264.7,同时检测应用PEI后RAW264.7对Alexa-LPS的结合有无改变。 结果:与空白组相比,LPS组TNF-α在mRNA和蛋白水平表达均明显升高。应用聚乙烯亚胺处理后,LPS+PEI组TNF-α在mRNA和蛋白水平表达均较LPS组有所下降,同时PEI组对RAW264.7的TNF-α表达量与空白组相比差异没有统计学意义。LPS组和LPS+PEI组对LPS的结合情况没有差异。 结论:聚乙烯亚胺对脂多糖已经引起的炎症反应有一定的抑制作用。
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