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近年来，斑点叉尾鮰一种急性流行性传染病频繁发生，初步诊断为由嗜麦芽寡养单胞菌引起的传染性套肠症。嗜麦芽寡养单胞菌致病因子的研究还未深入且少见报道。本试验从嗜麦芽寡养单胞菌胞外产物中提纯到一种胞外蛋白酶（ECPase），并对提纯的ECPase进行了致病性研究，以期搞清胞外蛋白酶是否是致病因子，其在致病中是否起重要作用，并为养殖生产中防治该病提供理论依据。在胰酪胨大豆肉汤（TSB）培养基基础上，对体外培养嗜麦芽寡养单胞菌的胞外蛋白酶（ECPase）产生条件进行了优化。结果发现，其产量与碳源、氮源、培养时间、培养温度、培养基初始pH值有关。其优化产酶条件为：以蔗糖作为碳源，胰蛋白胨作为氮源，培养基初始pH值为7.0，在20℃下120r／min振荡培养72h，嗜麦芽寡养单胞菌可产生大量的ECPase。在优化培养条件下，采用硫酸铵盐析、DEAE-Sephadex A50离子交换层析、SDS-PAGE等方法对嗜麦芽寡养单胞菌的胞外蛋白酶进行了分离纯化。结果表明嗜麦芽寡养单胞菌产生一种单一多肽，分子量为45.7Kda的胞外蛋白酶。将倍比稀释的胞外蛋白酶与96孔板培养的Vero细胞一起培养，发现Vero细胞变性坏死，脱落，出现空斑；将ECPase腹腔注射小白鼠和斑点叉尾鮰，表现出很高的死亡率。其对小白鼠和斑点叉尾鮰的LD50分别为4.33ug／g和3.49ug／g体重。接种小白鼠精神倦怠，排黏液便，剖解发现严重胃肠炎症状，肠道扩张，脾严重肿大、出血；光镜下可见肠粘膜上皮细胞坏死脱落，心肌细胞肿胀，严重颗粒变性，脾脏出血，大量红细胞浸润。死亡斑点叉尾鮰鳃丝肿胀，出现轻微肠炎，肝、脾、肾肿大等病变；肝细胞和肾小管上皮细胞变性坏死，脾出血，肝、脾、肾是ECPase作用的靶器官；超微病变也很明显，主要表现为多数组织器官的细胞核膜扩张，核染色质溶解消失，线粒体肿胀。虽未见临床上广泛出现的肠套叠现象，但肝、脾、肾的病变均与该菌自然感染发病的病变相似，表明嗜麦芽寡养单胞菌胞外蛋白酶是一种重要的致病因子。