目的:　　炎症和肿瘤之间的相互作用一直是关注的焦点，前期研究表明，膀胱癌组织内存在大量淋巴细胞的浸润，提示炎症与膀胱癌之间存在密切联系。已有研究表明，淋巴毒素β受体(Lymphotoxinβ receptor，LTβR)在多种肿瘤中广泛表达，且活化的LTβR可激活核转录因子-κB(Nuclear factor-κB，NF-κB)，从而影响肿瘤细胞的增殖水平和肿瘤炎性微环境的形成过程。然而LTβR信号活化在不同肿瘤中的作用效果不一致，且其在膀胱癌中的作用尚未阐明。因此本研究以人膀胱癌细胞株5637为研究对象，采用特异性配体淋巴毒素α1β2(Lymphotoxinα1β2，LTα1β2)激活LTβR信号和小发夹RNA(small hair RNA，shRNA)干扰LTβR表达的方式，旨在:　　1、探讨LTβR的活化对膀胱癌细胞内NF-κB信号通路主要成员RelA/p65、RelB mRNA表达水平、活化状态的影响及其在膀胱癌炎性微环境形成过程中的作用。　　2、探讨LTβR的活化对膀胱癌细胞增殖水平的影响。　　方法:　　1、LTβR的激活试验:利用特异性配体LTα1β2作用于人膀胱癌细胞5637，诱导LTβR活化，分组为:未激活组和LTα1β2激活组。①实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR，qRT-PCR)检测NF-κB信号通路成员RelA、RelBmRNA，细胞因子淋巴毒素α(Lymphotoxinα，LTα)、淋巴毒素β(Lymphotoxinβ, LTβ)、LIGHT(lymphotoxin-like, exhibits inducible expression and competes withherpes simplex virus glycoprotein Dfor herpes virus entry mediator,a receptorexpressed by T lymphocytes)、肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factorα，TNFα)、白细胞介素-6(Interleukin-6，IL-6)、白介素-1β(Interleukin-1β，IL-1β) mRNA，增殖相关基因细胞周期素D1(CyclinD1)、生存素(Survivin) mRNA的表达水平变化;②蛋白免疫印迹(Western Blot，WB)检测NF-κB信号通路p65蛋白536丝氨酸(ser536)位点磷酸化水平(p-p65)的改变;③CCK-8(cell counting kit-8)法检测细胞增殖水平变化。　　2、LTβR shRNA干扰试验:采用脂质体介导将LTβR shRNA干扰质粒（shRNA1、2、3）及阴性shRNA质粒(shRNA-NC)转染入人膀胱癌细胞株5637，干扰LTβR的表达，转染分组为:shRNA1组、shRNA2组、shRNA3组、shRNA-NC组，采用qRT-PCR和WB方法从mRNA水平和蛋白水平检测干扰质粒对LTβR表达水平的影响，计算干扰效率，确定最优干扰序列(shRNA-optimal)。　　3、低水平LTβR细胞的激活实验:前期通过shRNA-optimal干扰明显降低LTβR表达后，加入特异性配体LTα1β2诱导LTβR活化，实验分组为:shRNA-optimal激活组、shRNA-NC激活组，①qRT-PCR检测NF-κB信号通路RelA、RelB mRNA，细胞因子LTα、LTβ、TNFα、IL-6、IL-1β mRNA，增殖相关基因CyclinD1、Survivin mRNA的表达水平变化;②CCK-8法检测细胞增殖活性的变化。　　结果:　　1、LTβR的激活试验:相对于未激活组（浓度为0），LTα1β2激活组中，①不同浓度(50、100、150、200ng/ml)LTα1β2诱导LTβR活化后均可促使RelA mRNA表达上调（P均＜0.05），以100ng/ml LTα1β2的上调效果最明显，可高达2.5倍，但不同浓度之间RelA mRNA的表达并未见显著性差异（P=0.244），RelB mRNA的表达水平在诱导后表达有升高的趋势，但未见显著性差异（P均＞0.05）;②WB结果显示100ng/ml LTα1β2诱导5min、15min后p-p65蛋白出现升高的趋势（P均＞0.05）;③细胞因子TNFα、IL-1β mRNA表达分别上调5倍和1.5倍(P分别为0.034、0.013)，而LTα、 LTβ、IL-6 mRNA表达均未见差异性改变(P均＞0.05)，且在膀胱癌细胞内并未检测到LIGHT mRNA的表达;④细胞增殖相关基因CyclinD1、Survivin mRNA表达分别上调2.7和1.3倍(P分别为0.002、0.035);⑤在LTα1β2刺激膀胱癌细胞24h、48h后，细胞增殖活性分别为(97.73±4.57)％、(98.11±4.62)％，均未见明显的变化（P均＞0.05）　　2、LTβR shRNA干扰效率:qRT-PCR显示，与shRNA-NC组相比，shRNA1组膀胱癌细胞LTβR mRNA表达下降65％～75％(P=0.001)，而shRNA2和shRNA3组分别降低51～61％和27～33％（P分别为0.003、0.006），因此选取shRNA1干扰序列作为最优干扰序列shRNA-optimal，用于后续实验研究。WB结果显示，shRNA1干扰5637细胞72h后，LTβR蛋白表达下调50％(P＜0.001)。　　3、低水平LTβR细胞的激活实验:与shRNA-NC激活组相比，shRNA-optimal激活组，①NF-κB经典通路的RelA mRNA表达水平为对照组的2/3（P=0.012），而RelB mRNA的表达无明显差异（P＞0.05）;②细胞因子TNFα、IL-1β mRNA表达分别下调27％和26％（P均为0.011），而其他细胞因子的表达并未受到显著的影响（P均＞0.05）;③细胞增殖相关基因CyclinD1、Survivin mRNA分别下调50％和38％（P分别为0.009、0.008）;④在LTα1β2刺激24h和48h后，细胞增殖活性分别为(108.19±5.15)％、(98.913±2.92)％，仍未见显著性差异（P均＞0.05）。　　结论:　　1、活化LTβR可促进NF-κB信号通路主要成员RelA mRNA的表达和活化。　　2、活化LTβR可能通过上调细胞内促炎细胞因子TNFα、IL-1β mRNA的表达参与膀胱癌炎性微环境的形成过程。　　3、活化LTβR有助于增殖相关基因的表达，但在细胞增殖水平上并未见明显效应。