氧化低密度脂蛋白诱导人巨噬细胞功能改变及相关调控机制研究

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目的:通过研究氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)诱导人THP1巨噬细胞炎症小体生成、焦亡发生、脂质吞噬、胞葬等细胞功能的改变,探讨巨噬细胞功能在动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)发生发展中的作用及相关调控机制。方法:给予人THP1巨噬细胞oxLDL处理,检测细胞炎症小体启动及活化标志物的表达水平、细胞焦亡、脂质吞噬及胞葬功能的改变。通过parthenolide(PTL)处理抑制核因子-κB(NF-κB)信号通路的表达,探究NF-κB信号通路在oxLDL诱导人巨噬细胞功能改变中的调控作用及机制。在此基础上,进一步探究临床上脑动脉粥样硬化性卒中患者反应性较好的药物丁苯酞、银杏二萜内酯对上述细胞功能的影响。结果:1、与对照组相比,oxLDL处理组、PTL处理组、PTL-oxLDL处理组THP1细胞炎症小体启动标志物pro-IL1β的表达水平明显升高。oxLDL通过上调NF-κB路径来调控THP1细胞的炎症小体启动,而PTL通过NF-κB之外的其他路径来调控THP1细胞的炎症小体启动。2、与对照组相比,oxLDL处理组、PTL处理组、PTL-oxLDL处理组THP1细胞炎症小体活化标志物NLRP3、ASC、caspase1(p45,p20)、pro-IL1β的表达水平均未见明显变化。3、与对照组相比,oxLDL处理组、PTL处理组、PTL-oxLDL处理组THP1细胞均未见明显的细胞焦亡。4、与对照组相比,oxLDL处理组THP1细胞内脂质吞噬量明显增加,oxLDL通过上调NF-κB路径来调控THP1细胞的脂质吞噬,丁苯酞预处理可以促进oxLDL诱导的细胞脂质吞噬,银杏二萜内酯预处理对oxLDL诱导的细胞脂质吞噬无明显影响。5、与对照组相比,oxLDL处理组THP1细胞胞葬作用明显增强,oxLDL通过上调NF-κB路径来调控THP1细胞的胞葬作用,丁苯酞预处理可以促进oxLDL诱导的细胞胞葬作用,银杏二萜内酯预处理对oxLDL诱导的细胞胞葬作用无明显影响。结论:1、oxLDL可以诱导THP1细胞的炎症小体启动、脂质吞噬及胞葬作用。2、NF-κB路径参与调控oxLDL诱导的THP1细胞炎症小体启动、脂质吞噬及胞葬作用。3、丁苯酞可以增强oxLDL诱导的THP1细胞脂质吞噬及胞葬作用。银杏二萜内酯对oxLDL诱导的THP1细胞炎性功能改变无明显作用。
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