嘧菌酯对蚯蚓和斑马鱼的氧化损伤及遗传毒性效应

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农药随灌溉、喷洒、流失会对农业用地附近的土壤和水体造成污染,并通过食物链对许多生物造成毒害作用,甚至危及整个生态系统。杀菌剂嘧菌酯自1996年由先正达公司登记上市以来,三年以内就成为了杀菌剂市场的领军者。嘧菌酯能通过阻碍线粒体的呼吸作用导致细胞死亡,对几乎所有的真菌纲病害均有很好的防治效果。作为用量如此之大的农药,已有很多研究在土壤和水体中检测到嘧菌酯的残留,其生态毒性效应也逐渐引起关注。本实验采用蚯蚓和斑马鱼两种指示生物,将蚯蚓暴露于嘧菌酯浓度为0、0.1、1、10mg kg-1的人工土(OECD标准)中,测定其活性氧自由基(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)谷胱甘肽解毒酶(GST)、丙二醛(MDA)含量、DNA损伤程度;将斑马鱼暴露于嘧菌酯浓度为0、1、10、100μgL-1的水溶液中,测定其ROS含量、SOD、CAT、GS T、MDA含量及DNA损伤程度。本研究通过以上指标综合地从氧化损伤和遗传毒性的角度评价了嘧菌酯对蚯蚓和斑马鱼的毒性效应,对于今后全面认识嘧菌酯对土壤和水生生态系统的毒性危害提供了基础数据。主要研究结果如下(1)在嘧菌酯影响下,蚯蚓体内的ROS生成过量,产生氧化应激压力,使SO D、POD和GST的活性升高,CAT活性的变化趋势不显示规律。染毒14天后,蚯蚓体内MDA的含量呈上升趋势,说明ROS积累导致了脂质过氧化反应的发生,过氧化产物发生累积。另外,通过单细胞凝胶电泳实验(SCGE)检测到蚯蚓体腔细胞发生DNA损伤,损伤程度随嘧菌酯浓度的增大而明显增大。(2)暴露于嘧菌酯水溶液中的斑马鱼肝脏内也产生了ROS的积累,过量的ROS对酶活性产生影响:抑制了雄鱼SOD的活性,对雌鱼SOD的影响是先激活后抑制;对较多处理的CAT呈激活作用,第21天后激活GST的活性。斑马鱼肝脏内产生氧化胁迫的结果,表现为脂质过氧化产物MDA含量的上升和DNA损伤程度加重,而且DNA损伤的剂量效应、时间效应关系明显。(3)本研究明确了所测各个指标之间相互作用相互影响的关系。并通过比较显著性差异得出了本实验中对于生物学效应响应灵敏的指标,为今后进一步研究其生态毒性提供了理论依据。
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