CBL蛋白是近几年发现的一类钙离子信号转导蛋白,CBL蛋白家族与CIPK蛋白家族构成的信号转导系统在植物应答外界生物或非生物刺激时发挥非常重要的作用。沙冬青与其他植物类似,也存在该系统。其中沙冬青中的CBL1蛋白(AmCBL1)蛋白和相应的CIPK蛋白联合作用,在植物抗逆境(低钾环境,干旱,冻伤及机械损伤等)应答中发挥重要作用。本课题围绕AmCBL1蛋白的初步晶体学研究范畴,通过定点突变AmCBL1蛋白表面的带电氨基酸,对蛋白质表面赖氨酸甲基化,消除蛋白表面多余电荷。同时运用分子生物学方法,亲和层析,分子筛层析,聚丙烯凝胶电泳等技术,证明电荷在蛋白非特异性聚集过程中发挥重要的作用,同时寻找聚合状态更均匀的蛋白质,其后对晶体生长条件进行初步筛选。实验结果符合预期,证明AmCBL1蛋白在钙离子存在情况下的非特异性聚集主要是由于分子间电荷相互作用所致,并预测三聚体蛋白复合物可能是该蛋白发挥功能的单位,甲基化后的蛋白聚合状态更加均匀,更适合蛋白晶体条件的筛选。