鱼类诺达病毒(piscine nodavirus)是多种养殖鱼类的重要病原，给养殖业造成了重大损失。 本文以赤点石斑鱼神经坏死病毒(RGNNV,Redspotted grouper-nervour necrosis virus)为研究对象，通过肌肉注射、浸泡和和共浴三种感染途径研究了鱼类诺达病毒对军曹鱼(Rachycentron canadum)仔鱼(平均体重约3.6g)的致病性。结果表明，三种方法都能导致军曹鱼仔鱼发病，病鱼临床症状典型，如食欲减退、活动力下降、体色发黑、部分鱼做螺旋状或亢奋游动等。肌肉注射组、浸泡组和共浴组的累计死亡率分别为78％、44％和32％。采用逆转录．聚合酶链式反应(RT-PCR)技术在患病鱼的脑、眼、脊髓中均能检测到诺达病毒，而在其它器官(鳃、肠、肝、脾、肾和肌肉)没有检测到，在肌肉注射组中检出病毒的时间最早、检出率最高；在共浴感染组和浸泡组检测到病毒的时间较晚，检出率较低。然而，在无临床症状的幸存个体中也检测到该病毒的存在。 本文还根据RGNNV的RNA2的ORF核苷酸序列，设计了一对特异性引物，采用RT-PCR技术扩增出了RGNNV的主衣壳蛋白(MCP)基因。扩增片段长为1017bp，编码338个氨基酸，编码蛋白的分子量约为37kD。将RGNNVD的MCP基因连接到表达载体pRSET A质粒中，构建了重组表达载体pRSET A-MCP，经PCR、双酶切和测序等方法验证了目的基因连接的正确性。将其转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS进行融合表达，所得融合蛋白分子量约为44.5kD。通过在不同培养基、不同温度和不同pH的条件诱导表达，进一步优化了表达条件，结果该重组菌在SOB和LB培养基，pH7.0，37℃条件下表达量较高，表达的融合蛋白主要以不可溶的包涵体形式存在，提取的包涵中融合蛋白含量占60％以上，经柱层析纯化蛋白，纯化度达90％以上。采取亲和层析和SDS-PAGE割胶两种方式对表达的融合蛋白进行纯化，分别将两种方式纯化的融合蛋白做抗原来免疫新西兰兔制备多克隆抗体。 将重组BL21/pRSETA-MCP表达的融合蛋白制备成疫苗，腹腔注射免疫军曹幼鱼(重约8.6g)。免疫分为一次免疫组(A)、三次免疫组(B)和对照组(C)。在A组和B组中按照分别免疫10μ/尾、50μ/尾、100μg/的剂量依次分为A1、A2、A3组和B1、B2、B3组(每组25尾实验鱼)。A组的死亡率和发病率均比对照组C低。其中A2组的相对存活率和相对保护率分别为31％和28％，三次免疫组B的死亡率比和发病率也均比对照组C低。B2组的相对存活率和相对保护率分别高达54％和56％。B2组和C组，累计死亡率呈现极显著差异，P＜0.01，B2组和C组发病率呈现显著差异，P＜0.04。两个免疫组间比较，三次免疫组B的死亡率和发病率均比一次免疫组A低。而且对于免疫的剂量而言，也存在差异，免疫注射剂量并不是量越大越好，注射50μg/尾的B2组的免疫效果明显好过10μg/尾的B1和100μg/尾的B3组。患病死亡个体中检测的阳性率各组均为100％，在幸存个体的检测中B2组的阳性率只有60％，A1，B3组的阳性率为80％，而对照组的检测率则高达100％。