【摘 要】
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目前测定血红蛋白的常用方法大致可分为三类:利用血红蛋白与某些试剂(如氰化物)反应生成在特殊波长有吸收峰的稳定化合物用比色法测量;利用血红蛋白本身所具有的过氧化物酶活性
【出 处】
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中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院
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目前测定血红蛋白的常用方法大致可分为三类:利用血红蛋白与某些试剂(如氰化物)反应生成在特殊波长有吸收峰的稳定化合物用比色法测量;利用血红蛋白本身所具有的过氧化物酶活性与试剂反应生成在特殊波长有吸收峰的稳定化合物用比色法测量;利用血红蛋白抗体结合放射性元素,酶或有色胶体颗粒进行测定.这些方法中绝大多数需仪器,操作较复杂,而用有色胶体颗粒标记的兔疫测定法具有快速、方便、不需仪器等优点而更适于战场,野外等特殊场合的血红蛋自快速测定.通过对不同标记缓冲液pH值,抗体用量情况卞,标记效率的试验,确定了pH7.5, 100μl l﹪ Latex悬液比100μg抗体为微球标记最佳条件.在此基础上,根据在层析膜上显色点的显色程度确定了最小微球用量和点膜抗原最小用量.为半定量试验确定了前提.固定血红蛋白检测限浓度(此处为0.5g/l),在用量范围内调节球标抗体和游离抗原的用量,分别找出了PBS样品和血清样品时两者的合适比例:PBS样品,6μl微球悬液加22μl0.5g/L血红蛋自PBS液,6μl微球悬液加27μl0.5g/L血红蛋白血清液.在此基础上,用系列浓度的血红蛋白PBS溶液和血清溶液按此比例进行了试验,取得较理想结果.这样就初步确定了血红蛋自0.5g/L半定量免疫层析试纸的基本要素,为进一步完善其工艺,达到工业化生产和战时使用打下了坚实基础.
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