HIV自发现以来,已经累计造成约4000万人死亡,并且到2015年为止大约有3670万人携带HIV病毒。HIV是一种逆转录病毒,能够攻击人类的免疫系统,可以潜伏在病人体内数多年而不发病,并且可以通过多种方式逃避机体的免疫系统的攻击。到目前还没有有效的疫苗来控制HIV的感染和蔓延,因此,对于HIV疫苗的研究和探索有很大的意义。因为HIVgp41糖蛋白的近末端区(MPER)是线性表位,高度保守而且富含酪氨酸,并且是广谱中和抗体2F5,4E10,10E8等识别的位点,因此本研究选择MPER表位作为研究对象。本研究利用白喉毒素A亚基(CRM197-A)作为蛋白载体,融合表达 MPER 的 2F5(ELLELDKWA)和 4E10(LWNWFDITNWL)表位,增强表位免疫原性。融合蛋白经过包涵体纯化后进行小鼠免疫评价。免疫后利用酶联免疫吸附实验(ELISA),病毒中和实验,流式细胞仪等方法评价免疫血清。免疫效果较好的小鼠进行杂交瘤细胞的制备并筛选MPER特异性单克隆抗体,并利用ELISA,丙氨酸扫描,病毒中和实验,同源模建对抗体进行性质鉴定。本研究也探索了 DNA初免,蛋白加强免疫策略在MPER表位特异性抗体诱导中的效果。免疫后用ELISA,病毒中和实验对免疫方案评估。研究表明,融合蛋白有较好的免疫原性,可以刺激小鼠产生Th1和Th2类的免疫反应,并且产生针对MPER表位的特异性抗体,而且部分小鼠血清可以检测到对不同病毒株的交叉中和。小鼠进行脾脏杂交瘤细胞制备筛选得到10株MPER表位特异性单克隆抗体。抗体对gp41上的MPER表位有较好的结合能力,18C8-1和21A1-1有交叉中和能力,丙氨酸扫描发现这两株抗体与4E10有相同的氨基酸识别位点。同源模建结果表明,18C8-2与MPER抗原结合主要是通过抗体的重链。DNA初免后部分方案免疫血清可以检测到较高反应性,完成蛋白免疫加强后,免疫血清中和能力较弱,因此需要进一步的探索。本研究首次证明,和4E10抗体识别相同表位的抗体可以在小鼠体内诱导出来,这为疫苗的研究和探索提供有力的支持。另外,本研究也证明,CRM197-A作为载体蛋白有较好的免疫原性,而且可以刺激小鼠的T细胞免疫应答,可以应用于其它疫苗的开发和研究。