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在肝癌中,总胆汁酸(TBA)和甘氨结合型胆汁酸(GCBA)明显高于正常组织,在增高的胆汁酸中,以疏水性胆汁酸为主,疏水性胆汁酸对多种细胞具有诱导细胞凋亡和毒性损伤作用[1],但对肝癌细胞作用机制还不是很清楚,因此研究疏水性胆汁酸对肝癌细胞的作用机制尤为重要。目的:(1)观察不同浓度的GDCA对肝癌SMMC7721细胞增殖与凋亡诱导的影响;(2)探讨GDCA诱导肝癌SMMC7721细胞凋亡机制。方法:(1)MTT实验检测GDCA对肝癌SMMC7721细胞增殖影响;(2)DNA梯度凝胶电泳检测GDCA诱导SMMC7721细胞凋亡片断;(3)FCM检测GDCA对肝癌SMMC7721细胞周期影响;(4)Annexin V-FITC实验对GDCA诱导SMMC7721细胞凋亡检测;(5)分光光度计法检测caspase-3/9活性。(6)RT-PCR实验检测细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax、P21、P27、cyclinD1、E2F1、c-myc、survivin mRNA的表达影响;(7)免疫组化检测突变P53、Bcl-2、cyclinD1、PCNA癌基因的蛋白表达影响;(8)PCR-ELISA法检测端粒酶活性;(9)RT-PCR检测端粒酶逆转录酶hTERTmRNA表达影响。结果:(1)GDCA可明显抑制肝癌SMMC7721细胞增殖,在小剂