胆总管梗阻致急性胆囊炎及胆总管梗阻解除后对肿瘤坏死因子-α及胆囊组织中巨噬细胞的研究

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目的:胆总管梗阻可以引起急性胆囊炎,因此,如何进一步认识胆总管梗阻是引起急性胆囊炎的一种原因,探索其防治措施为患者减轻痛苦、避免患者遭受不必要的胆囊切除手术是本试验的重要目的。本研究采用家兔胆总管结扎致胆总管梗阻动物模型,观察胆总管梗阻不同时间及梗阻解除后的家兔体温(temperature)、白细胞(white blood cell)、胆囊组织内巨噬细胞(macrophage)的数量,以及血清及组织中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)数值的变化,探讨胆总管梗阻引起急性胆囊炎的作用机理,为其治疗提供实验依据。方法:选择健康家兔72只,体重2kg-3kg,雌雄不限,随机分为正常对照组(N组),胆总管梗阻1天组(D1组)、3天组(D3组)、5天组(D5组)、7天组(D7组)、胆总管梗阻1天后解除组(R1组)、胆总管梗阻3天后解除组(R3组)、胆总管梗阻5天后解除组(R5组)、胆总管梗阻7天后解除组(R7组)、每组8只,解除梗阻组均解除3天后处死。所有家兔手术前一天禁食,不禁水。手术时,家兔以3%戊巴比妥钠麻醉,无菌操作,上腹正中切口,剖腹后观察腹腔大体情况,游离胆总管下段,经胆总管后置一外径2mm的细硅胶管(导管内穿引一10号丝线),置入管及穿引线经皮下隧道由腹壁戳孔穿出,引出处位于两侧肋缘下,距切口2cm,提起硅胶管和丝线,其紧张度以能阻止胆流为度,固定悬吊的胶管,关腹。正常对照组仅开腹游离胆总管,不置入硅胶管,梗阻解除组将置入管由腹壁抽出解除梗阻。术后禁食,自由饮水。造模后放置于代谢笼中,梗阻组分别于造模1天、3天、5天、7天后处死,解除组均于胆总管解除3天后处死,处死前测量家兔体温。各组均留取静脉血标本,检测白细胞数值,放射免疫法检测血清中肿瘤坏死因子-α的数值,摘取胆囊,并取胆囊底部(保证各组所取标本部位一致),称重200mg,研磨成匀浆,离心后取上清液于-20℃保存,用于放射免疫法测量肿瘤坏死因子-α。取其余适量胆囊组织置于10%甲醛中固定,制作石蜡切片,采用免疫组织化学方法测量胆囊组织中的巨噬细胞的数量,所有数据结果均以均数±标准差表示,各组间均数比较采用因素方差分析,p<0.05认为有统计学意义。结果:白细胞:家兔血液中白细胞数值随梗阻时间的延长逐渐升高,造模组与正常组有差异(p<0.05),梗阻解除组与梗阻组比较有差异(p<0.05),R1与D1比较白细胞数值下降,有差异(p<0.05);R3与D3比较白细胞数值下降有差异(p<0.05);R5与D5比较白细胞数值下降有差异(p<0.05); R7与D7比较白细胞数值下降有差异(p<0.05)。体温:家兔体温随梗阻时间的延长逐渐升高,造模组与正常组差异(p<0.05),梗阻解除组与梗阻组比较有差异(p<0.05),R1与D1比较体温下降有差异(p<0.05);R3与D3比较体温下降有差异(p<0.05);R5与D5比较体温下降有差异(p<0.05); R7与D7比较白细胞数值下降有差异(p<0.05)。TNF-α:家兔梗阻组血清中和胆囊组织中肿瘤坏死因子-α也随着梗阻时间的延长逐渐增多。各组与正常组差异(p<0.05),梗阻组组间有差异(p<0.05),梗阻解除组与梗阻组比较有差异(p<0.05),R1与D1比较减少有差异(p<0.05);,R3与D3比较减少有差异(p<0.05),R5与D5比较减少有差异(p<0.05),R7与D7比较减少有差异(p<0.05)。巨噬细胞:家兔胆总管梗阻组胆囊内巨噬细胞的数量的表达随梗阻时间的延长表达也增多,各组与正常组比较增多,有差异(p<0.05),梗阻组组间有差异(p<0.05),R1与D1比较减少有差异(p<0.05),R3与D3比较减少有差异(p<0.05),R5与D5比较减少有差异(p<0.05)。R7与D7比较减少有差异(p<0.05)。结论:1胆总管梗阻能引起家兔的体温升高,白细胞的升高及胆囊组织巨噬细胞的增多及血清和胆囊组织肿瘤坏死因子-α的升高,引起急性胆囊炎,并随梗阻时间的延长,胆囊炎症越重。2胆总管梗阻的解除对可以降低胆总管梗阻家兔的体温,降低胆囊组织的巨噬细胞及血清和胆囊组织肿瘤坏死因子-α,能减轻胆囊炎症。
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