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杂色鲍（Haliotis diversicolor）是一种重要的经济贝类,其生活史中存在附着变态过程。本研究在实验室获得的杂色鲍转录组数据基础上,采用SMART-RACE技术克隆获得胰岛素/胰岛素样生长因子信号通路（IIS）中的胰岛素诱导蛋白和胰岛素降解酶,分别命名为HdINSIG2和HdIDE。结合qPCR、原核表达、酶联免疫、RNAi和原位杂交技术研究了IIS信号通路成员HdINSIG2、HdIDE、HdIGFBP7和HdMIRP对杂色鲍幼虫细胞增殖和凋亡的作用。主要结果如下:1)HdINSIG2 cDNA全长为1400 bp;其中5’UTR为123 bp,3’UTR为677 bp,ORF为600 bp;编码199个氨基酸;含有5个跨膜结构域。qRT-PCR显示,在胚胎发育过程中,HdINSIG2在幼虫发育的卵裂阶段表达量相对较高;胚后阶段表达量显著低于卵裂阶段（P<0.05）。2)HdIDE cDNA长为4244 bp;其中5’UTR为118 bp,3’UTR为1054 bp,ORF为3072bp;编码1023个氨基酸;包含一个典型的蛋白酶M16功能域和两个蛋白酶M16C功能域。此外,HdIDE包含一个高度保守的HxxEH基序、Zn2+催化位点以及与底物结合的位点。qRT-PCR显示,HdIDE在胚胎各发育阶段均有表达,表达水平略有波动;呈现明显的高-低-高-低-高的波动表达模式。3)构建pGEX-4T-2-HdIGFBP7和pGEX-4T-2-HdMIRP原核表达载体,转化原核表达菌株BL21。IPTG诱导表达,SDS-PAGE分别检测到约为51 kDa和39 kDa的目的条带。经Ni亲和层析柱纯化目的蛋白后,制备多克隆抗体。ELISA间接法检测Hd IGFBP7和HdMIRP多克隆抗体效价分别为51200和6400。4)RNAi实验结果显示:添加HdINSIG2和HdIDE的dsRNA后,与对照组相比幼虫的变态率和死亡率无显著变化（P>0.05）。诱导实验结果显示:添加GABA组幼虫变态率极显著高于阴性对照组（P<0.01）;添加HdIGFBP7融合蛋白组变态率显著高于阴性对照组（P<0.05）;添加Hd MIRP融合蛋白组变态率与阴性对照组不存在显著差异（P>0.05）。并且GABA组、HdIGFBP7组和HdMIRP组幼虫死亡率显著低于阴性对照组（P<0.05）。5)采用原位杂交法检测幼虫细胞增殖和凋亡情况。结果显示:HdINSIG2干扰后,HdCaspase3、HdH3和HdPCNA显色位置以及颜色的深浅同对照组结果无显著差异。HdIDE干扰后,腹侧内脏团和内脏团近背侧检测到HdCaspase3的表达,而阴性对照和空白对照组只在腹部内脏团处检测到阳性信号;HdH3和HdPCNA显色位置与对照组一致,但显色较浅。添加HdIGFBP7和HdMIRP融合蛋白后,腹侧内脏团和内脏团近背侧检测到HdCaspase3的表达,而阴性对照和空白对照组只在腹部内脏团处检测到阳性信号;HdH3和HdPCNA显色位置与对照组一致,但显色较深。它们的显色结果与GABA组类似。