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细菌源脂肽类抗生素于上世纪60年代末从枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis的代谢产物中被发现,在之后的半个世纪中其抗植物病原真菌、细菌、肿瘤等活性研究被大量报道,但迄今细菌源脂肽无法规模化提取与纯化,因此其应用研究难以开展。本文克服了细菌源脂肽的表面活性与起泡特性对其分离纯化过程的干扰,首先为新结构且活性好的BM脂肽建立了经济可行的规模化制备工艺。严格遵循“以极性为依据循序渐进除杂”的原则,对酸化沉淀、甲醇浸提、有机溶剂沉淀、盐析、萃取、硅胶柱层析与HZ806大孔树脂吸附等成熟且易于放大的分离纯化单元工艺进行试验与优化,考察细菌源脂肽表面活性对这些工艺的影响,逐步去除杂质,建立其规模化制备新工艺,并最终获得高纯度脂肽样品。新工艺从含量为120 mg/L BM脂肽的海洋芽孢杆菌Bacillus marinus B-9987的发酵液中,规模制备了 87.51%-100%纯度的BM脂肽样品,收率>81.73%,实现了高纯度细菌源脂肽样品的百克级制备。而且该工艺对原料要求较低,允许发酵阶段使用天然培养基,可从既有芽孢杆菌微生物农药的规模化生产过程中分离纯化其中的脂肽,具有实际应用价值。各分离纯化单元工艺均规避了脂肽水溶液的乳化起泡问题与耗时耗能的水溶液蒸发浓缩过程,经济可行。随后,将BM脂肽的规模化制备工艺应用于解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens TYg 3-2所产Bacillomycin D脂肽,证实了前者的普适性。结合响应面优化建立了高产Bacillomycin D的5L罐发酵工艺,获得含量为21.31%的Bacillomycin D脂肽粗提物;基于此高含量的原料建立了其高纯度样品的可放大制备工艺,所制备样品的纯度可达94.57%,收率为61.41%,并将分离纯化步骤从优化前的11步减少至6步,进一步提高了制备效率。基于规模化制备的BM脂肽纯化样品,按照我国农药登记要求,对其进行包括急性经口毒性试验、急性经皮毒性试验、急性吸入毒性试验、皮肤刺激试验、眼刺激试验与皮肤变态反应(致敏)试验在内的急性毒理学试验,对其毒力进行了量化,并明确其为低毒化合物。BM脂肽部分纯化样品防治灰霉病的田间药效试验表明:500 mg/L BM脂肽对灰霉病的防效可达67.53%,略逊于常用药剂400 mg/L嘧霉胺的74.05%与500 mg/L异菌脲的76.57%;此外,盆栽试验结果表明,BM脂肽可以显著提升其产生菌B.marinus B-9987防治黄瓜灰霉病的防效:500mg/L BM脂肽与3×106 CFU/mL B.marinus B-9987(芽孢菌剂)混合使用,其防效可达81.33%,优于单独施用BM脂肽的72.83%及单独施用菌剂的64.17%,也优于阳性对照药剂400 mg/L嘧霉胺的73.33%。综上,本文为BM脂肽建立了经济实用的规模化制备工艺,实现了百克级高纯度细菌源脂肽样品的制备;BM脂肽规模化制备工艺可推广应用于B.amyloliquefaciens TYg 3-2所产的Bacillomycin D脂肽的分离纯化,证实其具有普适性,具有推广和进一步放大的价值;利用高纯度BM脂肽进行了农药登记必须的急性毒理学试验,证明其为低毒化合物;BM脂肽的田间药效试验证实海洋细菌源脂肽可防治灰霉病。本文不仅科学地为新结构且活性好的BM脂肽提高其规模化制备工艺,而且对其他脂肽类化合物的规模化制备工艺的建立具有重要的参考价值,同时也为BM防治灰霉病农药的创制奠定良好的基础。