【摘 要】
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目的:本实验旨在研究趋化因子配体23（CCL23）及趋化因子受体1（CCR1）与人上皮性卵巢癌细胞顺铂耐药的关系,为其成为卵巢癌靶向治疗的提供相关理论依据。方法:qRT-PCR法检测人上皮性卵巢癌顺铂耐药细胞C13K及其敏感细胞OV2008中CCL23及CCR1 mRNA表达;构建过表达CCL23慢病毒感染OV2008细胞,经嘌呤霉素筛选出稳定过表达CCL23的OV2008细胞株,倒置荧光显微镜及
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目的:本实验旨在研究趋化因子配体23（CCL23）及趋化因子受体1（CCR1）与人上皮性卵巢癌细胞顺铂耐药的关系,为其成为卵巢癌靶向治疗的提供相关理论依据。方法:qRT-PCR法检测人上皮性卵巢癌顺铂耐药细胞C13K及其敏感细胞OV2008中CCL23及CCR1 mRNA表达;构建过表达CCL23慢病毒感染OV2008细胞,经嘌呤霉素筛选出稳定过表达CCL23的OV2008细胞株,倒置荧光显微镜及qRT-PCR分别观察转染细胞内绿色荧光表达及CCL23表达情况;平板克隆及CCK-8法分别检测过表达CCL23组、空载体组及空白对照组OV2008细胞增殖活性及顺铂半数抑制浓度（IC50）;BX471（CCR1受体拮抗剂）干预后,CCK-8法检测过表达CCL23组、空载体组及空白对照组OV2008细胞的增殖活力及IC50的变化,Western blot检测细胞CCL23、CCR1及耐药蛋白YAP表达;免疫组化检测卵巢癌组织、卵巢癌转移网膜及癌未转移网膜组织中CCL23表达水平;Kaplan-Plotter在线平台分析CCL23表达水平与卵巢癌患者生存预后,及其与铂类化疗及贝伐珠单抗治疗预后之间关系。结果:人上皮性卵巢癌顺铂耐药细胞C13K中CCL23及CCR1 mRNA表达明显高于人上皮性卵巢癌顺铂敏感细胞OV2008,两者差异具有统计学意义（P<0.01）;倒置荧光显微镜下观察到细胞状态良好且带有绿色荧光表明CCL23过表达组OV2008细胞成功建立,CCL23过表达组CCL23 mRNA水平相较于空载体组及空白对照组OV2008细胞显著上升（P<0.001）,而CCL23过表达组细胞CCR1 mRNA表达却无改变（P>0.05）;与空白对照组及空载体组OV2008细胞相比,CCL23过表达可使OV2008细胞增殖加速,对顺铂耐受性增加（P<0.01）;BX471干预可抑制细胞中CCR1及CCL23 mRNA表达,同时使细胞增殖活性降低,细胞对顺铂敏感性增加。随着CCR1被抑制,细胞中YAP、CCL23及CCR1蛋白表达均下降;CCL23在上皮性卵巢癌中呈阳性表达,CCL23表达与卵巢癌临床期别关系密切,且网膜癌转移组织中CCL23表达显著高于网膜癌未转移组织;CCL23高表达卵巢癌患者生存预后优于CCL23低表达卵巢癌患者,CCL23表达与铂类化疗及抗血管生成治疗卵巢癌患者生存期存在相关性。结论:1.细胞C13K中CCL23及CCR1在mRNA水平中的表达明显高于细胞OV2008。2.CCL23过表达后可加强OV2008细胞的增殖能力,同时提高对顺铂的耐受性。3.BX471干预后抑制细胞中CCL23及CCR1mRNA表达,同时耐药蛋白YAP表达下降,细胞增殖能力和顺铂耐受性下降,表明CCR1通过调控CCL23和YAP表达影响卵巢癌细胞对顺铂的敏感性。4.CCL23在上皮性卵巢癌中呈阳性表达,其表达水平与患者临床分期呈正相关;且CCL23与卵巢癌网膜转移相关。5.CCL23表达与卵巢癌患者预后呈负相关,CCL23表达与铂类化疗及抗肿瘤血管生成治疗相关。
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