持续低流量灌注对离体鼠心保存效果的实验研究

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目的:单纯低温静置保存是效果已被验证的心脏保存方法,但是术后早期的心功能抑制还是比较常见的,而且此方法的心脏保存时间较短,只有4-6h。持续低流量灌注是新型的心脏保存方法,本课题就是采用改良Langendorff装置,以HTK液和FWM液为心脏保存液,比较单纯低温静置保存和持续低流量灌注两种不同的保存方法对离体鼠心的保存效果,并对HTK液和FWM液的心肌保存效果进行评价。方法:32只SD雄性大鼠随机分成4组(每组8只),HTK液单纯低温静置组(H1组),HTK液持续低流量灌注组(H2组),FWM液单纯静置组(F1组),FWM液持续低流量灌注组(F2组)。开胸取出心脏后迅速转移并固定于Langendorff灌流装置上,用K-H液经主动脉恒压灌注30min,再经主动脉根部灌注4℃保存液,F1、F2组灌注FWM液,H1、H2组灌注HTK液,待心脏停跳后,在4℃条件下,F1,H1组心脏分别浸于FWM液和HTK液中,静置保存8h;F2,H2组心脏以10cm H2O的压力分别持续灌注FWM液和HTK液,灌注8 h。8h后,重新将鼠心移至Langendorff装置上,复灌K-H液60min。于灌停前及复灌后测定心率(HR)、冠脉流量(CF)、左心室发展压(LVDP)、心率室内压乘积(RPP)、左心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)、左心室内压最大下降速率(-dp/dtmax)等指标,并计算各种参数的恢复率,同时留取冠脉流出液测定心肌酶(CK-MB,LDH)漏出量。灌注结束后,取心肌组织测定含水量并制作光镜标本观察心肌组织结构变化。结果:复灌后,F1组8只心脏均未复跳,心功能恢复率为0。复灌过程中我们发现,心脏颜色苍白,触之质硬,如“石样心”。心肌含水量,心肌酶漏出量明显高于其余三组(P<0.01)。H2组再灌注后左室发展压恢复率(77.7±3.4)%,心率恢复率(80.2±5.3)%,冠脉流量恢复率(54.6±6)%,心率室内压恢复率(60.6±2.1)%,心肌含水量(79.5±0.7)%,+dp/dtmax(60.1±5.9)%,-dp/dtmax (57.6±4.6 ) %与其余三组比较,差异有统计学意义(P<0.05),心肌保护效果好。光镜下病理图片显示:H2组:间质轻度水肿,心肌排列规则,偶见心肌细胞断裂、溶解,嗜色性较好。F1组:间质水肿明显,大片心肌细胞变性,排列紊乱,横纹消失,心肌细胞断裂,溶解,嗜色性差。H2组和F2组,H1组和F1组比较,在保存技术和保存时间相同的条件下,HTK液心肌保护效果优于FWM液,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:实验结果显示:与单纯低温静置保存技术相比,持续低流量灌注技术对心肌的保护作用更强,可延长心脏的保存时间;在相同实验条件下,HTK液对心肌的保护作用要优于FWM液。
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