白细胞介素-18和Nephrin在糖尿病肾病大鼠的表达及替米沙坦干预的研究

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近年来研究证明炎症因子是引起糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)的一个重要因素。白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)作为炎症反应中一种多效细胞因子,在炎症级联反应中具有重要作用,其在DN发生发展中的作用日益受到重视。Nephrin是肾小球足细胞裂孔隔膜的主要组成成分之一,对维持肾小球滤过屏障的完整性起关键作用,其表达减少代表着肾小球滤过膜的损伤。血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(angiotensinⅡreceptor angtagonist, ARB)能够通过血流动力学和非血流动力学作用保护肾脏,但具体的机制还不完全清楚。本课题通过观察IL-18和Nephrin在DN大鼠肾组织中的表达变化及替米沙坦的影响,探讨IL-18参与DN发生发展的机制及替米沙坦对肾脏的保护机制,为进一步了解DN的发病机制和寻找新的治疗方案提供理论依据。目的:通过观察DN大鼠肾组织中IL-18和Nephrin的表达情况,及IL-18对Nephrin的表达影响,研究IL-18在DN发生发展中的作用及意义,进一步探讨DN的发病机制;同时通过观察替米沙坦对肾组织中IL-18和Nephrin表达的影响,探讨其通过非血流动力学对肾脏的保护机制。方法:选用雄性Wistar大鼠,采用链脲佐菌素空腹一次性腹腔内注射法建立DN大鼠模型,将DN模型大鼠随机分为2组:DN模型组(n=14)、替米沙坦组(n=13),另设正常对照组(n=10)。替米沙坦组每日给予8mg/kg体重的替米沙坦灌胃一次;正常对照组和DN模型组每日以等量饮用水灌胃。全部大鼠不限饲料,随意饮水。8周后,收集24小时尿量,采取心脏穿刺取血处死大鼠,采集血液和肾脏标本,测量大鼠体重、肾重、24小时尿量,测定24小时尿蛋白定量、血糖、血尿素氮、肌酐水平;HE染色,显微镜下观察各组大鼠肾组织病理改变,采用免疫组化ABC法检测各组大鼠肾组织IL-18和Nephrin的表达情况。结果:(1)与正常对照组相比,DN模型组大鼠体重减轻、24h尿蛋白定量明显增加、肾功能下降(P<0.01),肾组织IL-18表达明显增多、Nephrin表达减少(P<0.01);肾小球体积增大,系膜区增宽、扩大,肾小球基底膜增厚,部分可见肾小球硬化、肾间质炎症细胞浸润、肾小管上皮细胞空泡变性。(2)与DN模型组相比,替米沙坦组大鼠体重增加、肾功能明显改善、24小时尿蛋白量减少(P<0.05),肾组织IL-18表达减少(P<0.05),Nephrin表达增多(P<0.01),肾脏病理改变减轻。(3)IL-18与24小时尿蛋白定量和肾功能成明显正相关(P<0.02);Nephrin与24小时尿蛋白定量和肾功能明显负相关(P<0.01);IL-18与Nephrin呈明显负相关(P<0.01);而血糖水平与24小时尿蛋白定量、肾功能、IL-18及Nephrin均无明显相关性(P>0.05)。结论:1.糖尿病肾病模型大鼠肾组织有炎症细胞浸润,IL-18表达升高,存在着炎症反应状态;2. IL-18与糖尿病肾病大鼠尿蛋白增多有关,提示IL-18参与了糖尿病肾病炎症反应过程和肾脏的损伤;3.替米沙坦可以减少肾组织1L-18的表达和蛋白尿,改善肾组织病理学变化,对糖尿病肾病大鼠肾脏具有保护作用,其机制可能与IL-18的表达减少、Nephrin表达增加等有关。
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