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本研究应用重组PCR技术将CTP序列融合至山羊FSHβ亚基羧基末端,构建成长效融合基因FSHβ-CTP。设计含有Kozak序列的PCR特异性引物,以FSHβ和hCGβ为模板,通过二级PCR反应,扩增出融合基因FSHβ-CTP。将FSHα、FSHβ-CTP和载体pVITRO经限制性内切酶酶切,连接,转化,成功构建了pVITROFSHαβ-CTP。通过基因测序鉴定FSHβ-CTP序列正确。
本实验成功构建了长效FSHβ-CTP基因,单链FSHβ-CTP-α基因,并在CHO细胞中获得了表达。为进一步开展长效FSH类似物的应用研究奠定了基础。