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近年来的研究表明,miRNAs与lncRNAs在基因的调控方面发挥着重要作用,其表达异常与肿瘤的发生和发展密切相关。SALL4在脑胶质瘤中异常过表达,与胶质瘤的发生有关。miRNAs与SALL4的调控关系目前只有我们实验室的一例报道,lncRNA对SALL4的调控作用还未见报道。实验室前期发现,具有相同种子区的miR-103、miR-195、mi R-15b过表达后,竞争性的抑制脑胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。为进一步研究miR-103、miR-195、miR-15b的作用,本论文将从miR-103、miR-195、miR-15b表达下调的角度研究其功能。应用MTT增殖实验发现,miR-103、miR-195、miR-15b表达下调后,能够显著的促进细胞的增殖能力;应用Transwell迁移、侵袭实验发现,miR-103、miR-195、mi R-15b表达下调后,能够不同程度的促进细胞的迁移和侵袭能力,并且同时转染miR-103、miR-195、miR-15b抑制剂后,对细胞的迁移和侵袭能力并没有产生协同增加的作用。说明miR-103、miR-195、miR-15b对脑胶质瘤细胞的作用是竞争性的;应用荧光素酶双报告系统、qRT-PCR、免疫荧光及细胞凋亡回复分析实验,发现miR-103、mi R-195、miR-15b直接靶向调节SALL4 mRNA的表达。通过RNAseq数据库分析发现,SALL4与LINC00665存在共表达。因此本论文探究了LINC00665在脑胶质瘤中的作用。首先,我们应用qRT-PCR对脑胶质瘤组织中LINC00665的表达进行了检测,结果显示,LINC00665在脑胶质瘤中呈现高表达状态。结合实验室前期SALL4的表达分析,应用SPSS软件进行统计分析,结果表明LINC00665与SALL4表达具有显著的正相关性。其次,应用原位杂交技术,发现LINC00665定位在细胞核中;接下来,我们构建了LINC00665过表达的稳转细胞系,应用MTT、细胞克隆形成实验、Transwell迁移和侵袭实验证明了LINC00665能够促进脑胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力;应用细胞周期PI染色、western blot分析发现LINC00665过表达后,细胞周期运动加速,cyclin D1蛋白质的表达显著增加。应用qRT-PCR、免疫荧光或western blot技术检测,发现LINC00665过表达后(1)抑制miR-103、miR-15b的表达,对mi R-195的表达没有显著的影响;(2)促进SALL4 mRNA和蛋白质的表达;(3)c-Myc和Tenascin-C的mRNA表达水平显著升高,c-Myc蛋白的表达显著升高。综上所述,miR-103/195/15b以SALL4为直接靶基因,三者共转染表达下调后竞争性的促进细胞的增殖、迁移和侵袭能力;在脑胶质瘤组织中,LINC00665呈现高表达状态,其定位于细胞核中,LINC00665过表达后,miR-103、miR-15b的表达下调,而SALL4、c-Myc和Tenascin-C表达上调,促进胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力。