冬枣(Ziziphus jujuba Mill.)果实多聚半乳糖醛酸酶多克隆抗体制备及抑制剂筛选

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:ydahu
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多聚半乳糖醛酸酶(Polygalacturonase.E.C.3.2.1.15.简称PG)是一种催化果胶物质降解的细胞壁水解酶,它广泛存在于植物体的各个部分,具有促进器官脱落、花药开裂、花粉管伸长以及果实软化的作用.有研究表明,在枣果实成熟软化过程中,PG起着主导作用.为研究PG在这一过程中的内在机制、实现利用基因工程的手段控制果实软化,该试验以鲜食枣品种冬枣为材料,对PG进行了纯化、抗体制备以及部分性质测定.通过对各种抑制剂对酶活性影响的研究发现,二价金属离子Ca<2+>、Mg<2+>、Zn<2+>、Hg<2+>均能部分抑制酶活性,Mn<2+>和Cu<2+>能强烈促进酶活性,EDTA可以促进酶活性,三价金属离子Fe<3+>对酶活性促进作用较强,而Al<3+>却可以强烈的抑制酶活性,Na<+>和K<+>在低浓度时对酶都有促进的作用,但在高浓度时有抑制作用;阴离子表面活性剂SDS和非离子型表面活性剂Triton X-100对酶活性有促进作用,在1﹪浓度时相对酶活性分别是150﹪和144﹪;阳离子表面活性剂CTAB抑制作用较强,在浓度0.1﹪时相对活性为70﹪;巯基试剂2-ME对酶活性具有较强的促进作用;植物生长调节物质2,4-D和IAA均能够抑制酶活性,而NAA和乙烯促进酶活性,GA<,3>对酶活性无影响.经SDS-PAGE测得枣PG蛋白的分子量是31500,比其它果实中的PG蛋白的分子量小;PG蛋白的pH稳定范围是4.5-8.0;最适离子强度范围是 0.04mol/L-0.06mol/L;PG酶的最大紫外吸收光谱是267nm.
其他文献
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本试验采用RT-PCR技术成功克隆出了影响苹果梨果皮着红色的关键酶基因CHI和F3H并做了相关生物信息学分析,之后采用实时荧光定量PCR对其在解袋前后的表达规律进行了检测。结果