他克莫司(Tacrolimus,FK-506)是1979年从日本筑波地区土壤中一种链霉菌株发酵产物中分离出来的23环大环内酯类抗生素(红霉素族)。分子式为C44H69NO12,分子量为803.48。水溶性很差,易溶于甲醇、乙醇、氯仿等有机溶剂；不易通过胃肠道吸收,动物试验显示吸收很差。FK-506是强效免疫抑制剂,主要用于器官和组织移植前后治疗机体的排斥反应,具有与环孢霉素A(CsA)相似而更广泛的免疫抑制作用,效力比CsA高10～100倍,而毒副作用更少。　　 目前,国内尚无自行研制的FK-506固体分散体胶囊剂,而进口制剂口服胶囊(1mg,粒)的售价高达32元/粒,系统研究并开发国产的FK-506口服固体剂型很有意义。因此本课题从国内医药工业的实际情况出发,试采用较简单的工艺和处方制备FK-506固体分散体硬胶囊剂。主要包括以下四部分内容:　　 一、他克莫司含量和体外溶出度测定分析方法的建立　　 建立HPLC-UV法测定FK-506固体分散体胶囊剂的含量。采用HypersilODS-2 C18柱,流动相乙腈-0.1％磷酸(65:35),流速1.0 mL/min,柱温60℃,检测波长UV220nm。FK-506在10～120μg/mL范围内呈良好的线性关系,回收率在100.01％～102.75％之间,RSD均<2％。在本色谱条件下,FK-506与有关物质分离度良好,方法灵敏度高,准确,重现性好。经过方法学评价,符合要求。　　 建立HPLC-UV法测定FK-506固体分散体胶囊剂体外溶出液中FK-506的含量。采用Luna ODS-2 C18柱,流动相乙腈-0.1％磷酸(70:30),流速1.0 mL/min,柱温60℃,检测波长UV230nm。FK-506在0.5～5.0μg/mL范围内呈良好的线性关系,回收率在98.33％～100.93％之间,RSD均<2％。方法灵敏度高,准确,重现性好。经过方法学评价,符合要求,该方法可用于FK-506固体分散体胶囊剂的处方筛选和质量评价。　　 二、他克莫司固体分散体的制备及其体外特性研究　　 采用表面活性剂泊洛沙姆188(F68)和硬脂酸聚烃氧(40)酯(S40),非表面活性剂聚维酮PVP k29/32和羟丙甲纤维素(HPMC E3)为水溶性载体材料,以溶剂-熔融法和溶剂法制备FK-506固体分散体。以溶解度和体外溶出度为重要指标,筛选合适的载体和药物/载体的配比。采用HPMC为载体材料制成的固体分散体,溶解度由原料药的2.79μg/mL增加至56.48μg/mL,在水中的溶出最快,5min即达73.11％。故最终选择HPMC为载体,FK-506/HPMC之比为1:5。差示扫描量热法(DSC)和X-射线衍射法(XRD)鉴别结果表明FK-506在固体分散体中以无定型或分子状态高度分散,以红外光谱测定法(FTIR)探测结果表明药物与载体间发生了相互作用。　　 采用二氯甲烷-乙醇的混合溶剂系统制备固体分散体。制备方法:首先将5gHPMC均匀分散在25mL乙醇中,逐渐添加已溶有1g FK-506的二氯甲烷25mL,轻轻搅拌至完全溶解。50℃旋转蒸发除去溶剂,-18℃冷冻6h,真空干燥24h,过80目筛即得。　　 三、他克莫司固体分散体胶囊剂的制备和质量标准研究　　 以体外溶出度为指标,选择微晶纤维素Avicel PH-301作为填充剂。以休止角为指标,选择加入2％微粉硅胶作为助流剂,粉体流动性的效果较好,休止角为35.75°。采用差示扫描量热法(DSC)探测药物与辅料之间的相互作用,表明微晶纤维素PH-301、微粉硅胶用于此处方不会对药物造成干扰。　　 确定FK-506胶囊剂的处方及制备工艺,重复制备3批胶囊剂,对其进行含量和有关物质、45min体外溶出度考察,均符合规定。采用f2相似因子法对3批胶囊剂的体外溶出度进行统计分析,f2值为70.5～100,无显著性差异。比较FK-506胶囊剂在4种溶出条件(水/50rpm、水/100rpm,PBS/100rpm,pH1.0/100rpm)下的体外溶出度差异,f2值均>50,无显著性差异,表明不同转速、pH值对FK-506体外溶出度的影响不大。　　 FK-506固体分散体胶囊剂的体外溶出机制初步探讨结果表明,Korsmeyer-Peppas模型的拟合效果最好,其溶出速率常数在不同转速、溶出介质下均<0.45,为典型的Fick扩散。　　 对FK-506固体分散体胶囊剂的质量标准进行研究:包括化学鉴别、TLC鉴别、HPLC鉴别,含量、有关物质和体外溶出度测定、乙醇和二氯甲烷残留量测定等。　　 四、他克莫司固体分散体胶囊剂的稳定性研究　　 稳定性研究项目包括外观,含量、有关物质和45min体外溶出百分数。　　 对FK-506胶囊剂影响因素试验结果表明,高温、高湿及光照对本品稳定性有一定影响。将3批FK-506胶囊剂采用双层铝塑复合膜包装,置30℃、RH60％条件下加速试验考核6个月,置25℃、RH60％条件下进行长期稳定性试验,结果均表明本处方制成的胶囊剂,各项检验指标均符合本品质量标准的有关规定,基本稳定。　　 本课题所研究的FK-506固体分散体胶囊剂基本达到设计要求。