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目的:类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是一种以关节炎和血管翳为主要表现的自身免疫性疾病,B细胞分化为浆细胞产生类风湿因子(Rheumatoid factor, RF)及抗环瓜氨酸肽抗体(anticyclic citrullinated peptide antibody, anti-CCP)等RA相关自身抗体,这些自身抗体在滑膜中依靠补体作用使抗原-抗体复合物激活巨噬细胞,从而造成关节的破坏,表明B细胞在RA发病机制起着重要作用。细胞凋亡作为一种调节机制,使T、B细胞保持相对平衡状态,维持正常的细胞免疫和体液免疫。RA发病进程中可导致细胞凋亡的异常,而Fas(CD95)/FasL系统在凋亡过程中的起重要调节途径。本研究通过检测RA患者外周血B细胞(CD20+细胞)和凋亡因子CD95的变化,以及血清、关节积液中sFas/sFasL的水平探讨B细胞和凋亡在RA发病中的作用。方法:选取RA患者30例,所有患者均符合2009年美国风湿病学院(American rheumatism institute)和欧洲风湿病防治联合会(European congress prevention federation)的RA分类标准,所选病例均为初治患者,既往未曾应用糖皮质激素(glucocorticoid, GC)、改变病情抗风湿药(disease modifying antirheumatic drug, DMARD)及生物制剂治疗。取20例健康人作为正常对照。两组均留取血清样本,病例组同时留取关节液。类风湿关节炎患者记录年龄、病程、症状、关节肿痛数、DAS28评分以及类风湿因子(RF)、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、环瓜氨酸抗体(anti-CCP)、免疫五项(IgA、IgM、IgG、C3、C4)等相关指标。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验( avidin biotin peroxidase complex enzyme-linked immunosorbent assay, ABC-ELISA)法测定血清和关节液中sFas/sFasL的水平,并与RF、anti-CCP、ESR、CRP等临床指标进行相关性分析;流式细胞仪(Flow cytometric, FCM)检测RA患者外周血B细胞(CD20)、凋亡因子CD95的表达情况,并与RF、anti-CCP、ESR、CRP进行相关性分析。数据分析采用SPSS17.0统计软件,计量资料采用均数±标准差(x±s)表示,两样本比较用独立样本t检验,多个样本比较则用方差分析。相关性采用直线相关分析,以P<0.05认为差异具有统计学意义。结果:1类风湿关节炎患者30例,男性6例,女性24例;平均年龄(48.73±14.86)岁;平均病程(32.87±30.60)月。其中伴有膝关节积液患者20例,男性3例,女性17例;正常对照组20例,男性5例,女性15例;平均年龄(45.00±11.08)岁。RA组与健康对照组在年龄及性别构成等方面无统计学差异(P>0.05)。RA组ESR(67.03±29.88)mm/h、CRP(32.06±22.68)mg/L、RF(413.58±463.72)IU/ml、DAS28评分(5.89±1.14)。2 RA患者血清sFas与sFasL的水平分别为(3.78±1.02)μg/L、(0.77±0.41)μg/L,均较正常对照组(2.68±0.81)μg/L、(0.36±0.21)μg/L显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。3 RA患者关节液sFas与sFasL的水平分别为(5.62±1.50)μg/L(、1.19±0.42)μg/L,均较血清sFas/sFasL水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。4 RA患者外周血CD20+、CD95+及CD20+/CD95+细胞的表达率分别为:(10.09±2.49)%、(41.35±7.63)%、(1.8±1.02)%,CD20+细胞表达率较正常对照组(12.28±2.55)%显著降低(P<0.01),差异有统计学意义;CD95~+细胞表达率较正常对照组(29.20±8.21)%显著升高(P<0.01),差异有统计学意义;CD20~+/CD95~+细胞表达率较正常对照组(2.43±1.11)%显著降低(P<0.01),差异有统计学意义。5 RA患者血清sFas与sFasL的水平与病情活动指标相关性:sFas水平与ESR及CRP呈显著正相关关系(r值分别为0.76, 0.81,P<0.01);sFasL水平与ESR、CRP呈显著正相关关系(r值分别为0.84, 0.54,P<0.01),sFas与sFasL均未发现与DAS28、RF有明显相关关系(P >0.05)。6 RA患者CD20+、CD95+及CD20+/CD95+细胞表达率与实验室指标相关性:通过直线相关性分析显示,外周血CD20~+、CD95~+及CD20~+/CD95~+细胞表达率与血沉、C-反应蛋白、RF、DAS28评分均无明显相关关系(P >0.05)。结论:1 RA患者血清sFas及sFasL高水平表达,且与ESR、CRP均呈显著正相关关系,说明sFas及sFasL可能作为病情活动指标,对RA病情监测有应用价值。2 RA患者的病变关节的关节液中sFas及sFasL的水平高于血清水平,提示sFas及sFasL可能在RA外周关节滑膜、关节软骨病变中起重要作用。3 RA患者外周血CD20+细胞表达率低于正常对照组,外周血CD95~+细胞表达率高于正常对照组,外周血CD20~+/CD95~+细胞表达率较正常对照组降低,说明B细胞凋亡可能在RA发病过程中有一定作用。