目前宫颈癌的发病率仍居世界妇女癌症的第二位，每年新发病例仍达50万，因此宫颈癌筛查已成为社会—经济—健康关注的焦点问题之一。筛查是阻断宫颈癌发生的重要手段，准确的诊断是筛查的重要组成部分；随着对宫颈癌治疗的深入研究，各级宫颈病变都有其针对性干预方案，而选择合理干预方案的前提是对宫颈各级病变进行精确的诊断。可见宫颈病变的诊断在宫颈癌的筛查及治疗中有重要的作用，而作为金标准的病理诊断属于组织形态学诊断，有一定的局限性。近年来的研究开始着手于利用一些宫颈癌相关因素来辅助宫颈病变的病理诊断，使宫颈各级别病变的诊断更加精确，以适应个性化的治疗方案。本研究就此目的对p16蛋白及高危型人乳头瘤病毒负荷量在宫颈病变诊断的辅助作用进行探索。 第一部分：HR—HPV负荷量结合年龄在ASCUS中的分流作用 目的：检测高危型人乳头瘤病毒(hihgriskhumanpapillomavirus，HR—HPV)的负荷量在宫颈不典型鳞状上皮细胞不明确意义(atypicalsquamouscellofundeterminedsignificance，ASCUS)的表达情况，并分析其结合年龄在ASCUS分流中的作用，对ASCUS患者进行更细致的分流，以尽早发现高危患者使其得到及时的干预，同时避免了低危患者的过度干预。 方法：对44例细胞涂片诊断为ASCUS患者进行HR—HPV负荷量检测和阴道镜检查，并在阴道镜下活检。以病理结果为最终诊断，结合年龄与HR—HPV负荷量，分析其在ASCUS分流中的作用。 所有数据均采用SPSS11.5forwindows统计软件包进行统计分析。用双变量相关分析——Spearman相关，分析年龄与ASCUS病理级别，ASCUS病理级别与HR—HPV负荷量之间的关系；用多分类Logistic回归分析结合年龄与HR—HPV负荷量在ASCUS分流中的意义。统计学显著性差异的界值为P<0.05。 结果：ASCUS患者的病理诊断中可能出现各级宫颈病变甚至宫颈癌。(1)年龄与ASCUS患者最后病理诊断的病变级别成正相关关系(rs=0.373，P=0.000)，即ASCUS患者中年龄越大患较高级别宫颈病变的可能性就越大。(2)而HR—HPV负荷量与ASCUS患者病理诊断的病变级别也成正相关关系(rs=0.528，P=0.000)，HR—HPV负荷量随着病变级别的升高也相应的增加。(3)HR—HPV负荷量结合年龄在ASCUS的分流作用：年龄小于30岁，HR—HPV负荷量在0～0.9pg/ml间的ASCUS患者预测只有3.7％机率患CIN2或以上病变，随着HR—HPV负荷量的增加患高度病变的几率越大，当HR—HPV负荷量大于100pg/ml患CIN2或以上病变的几率高达76.8％；而年龄大于30岁的患者则HR—HPV负荷量只要大于10pg/ml就有65.7％～89.5％的机率患CIN2或以上病变。 结论：随着ASCUS患者年龄的增高、HR—HPV负荷量的增加患高度病变的几率就越大，因此对于HR—HPV阳性的ASCUS患者可考虑参考其HR—HPV负荷量及年龄，作为ASCUS分流的检测指标，指导ASCUS患者选择合适的临床干预方案。 第二部：分p16在不同级别宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中表达差异的研究 目的：检测p16蛋白(在此以后本文用p16表示)在不同级别宫颈上皮内瘤变和宫颈癌中免疫组化染色的表达情况。探索p16在不同级别宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中的表达差异，以寻找一种经济有效，快速的辅助诊断方法，使作为组织形态学的病理诊断更加清晰明了，以便合理地选择不同的治疗方案，指导不同级别宫颈上皮内瘤变及宫颈癌的治疗，避免治疗不足或过度干预。 方法：采用免疫组织化学染色技术检测p16在15例宫颈上皮内瘤变I级(CIN1)、20例宫颈上皮内瘤变II级(CIN2)、20例宫颈上皮内瘤变Ⅲ级(CIN3)和20例宫颈癌(CC)中的表达情况。 所有数据均采用SPSS11.5forwindows统计软件包进行统计分析，用Spearman相关分析比较患者的病理级别与p16表达强度的关系，再用多个独立样本非参数秩和检验来分析各组不同病理级别宫颈病变间p16表达的差异。以P<0.05为统计学差异有显著性。 结果：(1)免疫组化p16在不同级别宫颈上皮内瘤变组织及宫颈癌组织中的细胞浆和/或细胞核染色，表现为不同级别宫颈病变可以有相同或不同的p16表达强度，而相同级别的宫颈病变同样也可有相同或不同的p16表达强度。本研究显示CIN1中p16阳性表达率为80％，CIN2及以上级别的病变中p16表达率为100％。其中CIN1病例p16的表达主要表现为弱阳性(73.33％)；在CIN2病例p16的表达仍然以弱阳性为主(65％)，但阳性表达(20％)和强阳性表达(15％)有所增加；CIN3病例p16表达阳性及强阳性的比例明显增多(55％)；病变发展到宫颈癌时，p16表达主要表现为强阳性(50％)，而仅有20％表达弱阳性。(2)患者宫颈病变的病理级别与p16的表达强度呈正相关关系(rs=0.554，P=0.00)。(3)在各组不同级别的宫颈上皮内瘤变和宫颈癌间p16的表达差异有统计学意义(x2=23.283，v=3，P=0.000)。从平均秩次看，CIN1:19.73；CIN2：33.73；CIN3：42.43；CC：51.55。随着宫颈病变的级别的上升，p16的表达强度就增强(CIN1