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喹诺酮类药物近年来发展迅速,主要应用于临床和动物治疗的新一代广谱抗微生物类药物。最近,喹诺酮类药物也广泛应用在水产动物的疾病治疗。但是由于人类对该类药物的滥用,使其产生耐药菌珠,药物残留已逐渐成为了威胁人类健康的严重问题。本论文应用反相高效液相色谱法(RP—HPLC)建立了测定中华绒螯蟹肝脏中诺氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星残留量的方法。考察了此三种喹诺酮类药物残留的分离与流动相组成、pn值及乙腈含量的关系,优化了色谱条件。中华绒螯蟹肝脏成分复杂,脂肪类化合物含量高,色素等干扰物质多,极易干扰目标物的检测。我们通过改进前处理过程,采用了振荡萃取—浓缩—高速离心萃取的前处理过程,有效的减少了干扰物质对结果的影响。研究表明,该方法线性关系和重复性良好,样品中三种喹诺酮类药物残留的回收率在73.26%~85.82%之间,最低检测限为10μg/kg。用该方法对肌肉注射恩诺沙星后72小时内中华绒螯蟹肝脏组织进行检测,其体内主要代谢物环丙沙星和恩诺沙星都可以检测到,为弄查明恩诺沙星在中华绒螯蟹体内的分布、代谢的研究提供了基础。
近几年水产养殖病害发生呈现暴发性、大规模、高死亡率的趋势,药物防治以其效果直接、操作简单而成为水产动物疾病首选的防治措施,而且将会在很长的一段时间内占据主导地位。然而,日前进行的药物防治研究多偏重于针对病原的药物筛选、使用浓度、使用方法等药效学方面,缺乏对药物间的相互作用、药代动力学、毒理学及对养殖生态环境的影响等基础理论的探讨,造成近期及远期的严重负面影响;而且随着渔药使用的加强和增多,残留量的蓄积亦不可避免,给人类健康和环境带来很大危害。针对这一普遍现状,本课题以国内的重要经济水产品中华绒螯蟹为试验对象进行了的研究,以期规范渔药临床使用,加强渔药的使用管理和残留监控,为食品卫生安全等提供可靠的理论依据。
研究中华绒螯蟹单次肌注恩诺沙星及其代谢产物环丙沙星的药代动力学。利用高效液相色谱法测定恩诺沙星和环丙沙星的组织浓度。实验数据由药代动力学分析软件3P97在电脑上进行分析。中华绒螯蟹在肌注恩诺沙星后,血淋巴中药物浓度即刻达到峰值,并迅速向组织中分布,经时过程符合一级吸收二级开放模型,肝脏,肌肉,鳃和血淋巴的主要药动学参数:Cmax为3.93,12.42,16.73 and11.04μg/g(mL);T1/2β为92.42,64.86,38.8 and 52.39 h;AUC0-∞为304.80,260.74,288.30 and 269.24 μg h/mL。在中华绒螯蟹肝脏,肌肉,鳃和血淋巴四种组织中均能测到恩诺沙星的代谢产物环丙沙星,主要药动学参数:Cmax为0.52,0.24,0.1 and 0.3μg/g(mL);T1/2β为36-38,65.36,112.88 and 93.33 h;AUC0-∞为35.06,25.64,11.57 and 39.99 μg h/mL。