对牛传染性鼻气管炎(IBR)的诊断,现有的国家标准规定为血清中和试验,由于该试验操作复杂,费时长、成本高,基层兽医难以采用。为了解决IBR的快速诊断问题,本研究试图采用PCR方法对牛传染性鼻气管炎进行快速的病原学诊断,研制间接ELISA试剂盒对牛传染性鼻气管炎进行快速血清学诊断。根据已发表的牛传染性鼻气管炎病毒gB基因序列,合成了两条引物,优化了反应条件,分别对IBRV的Bartha Nu/67株,IBRV-BK125株DNA模板进行扩增,结果对两株IBR病毒DNA均可扩增出362bp的特异性片段;对伪狂犬病毒(PRV)、火鸡疱疹病毒(HVT)及牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)进行扩增均未见特异性条带。灵敏性检测表明,该PCR方法对IBR病毒的检出限量为711TCID50。以IBR山羊肾细胞病毒液作为包被抗原,建立了检测IBRV血清抗体的间接ELISA方法,并确定了抗原包被稀释度、血清稀释度、鼠抗牛IgG单抗稀释度、血清作用时间、封闭液、封闭时间、酶标抗体稀释度与作用时间、底物显色时间和判定临界值。利用该方法检测138份临床血清样品,与中和试验相比较,特异性为93.5%,敏感性为93.5%,符合率为93.5%;与IDEXX试剂盒相比,符合率为97.6%。利用该方法检测本实验室保存的230份牛血清,168份为阳性,与IDEXX试剂盒相比,符合率为87.8%;检测35份IBR感染的牦牛血清,21份为阳性,与中和试验相比,符合率为85.7%。