慢速冷冻不同方法复温兔断肢再植后骨骼肌病理变化的研究

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目的:通过实验研究慢速冷冻不同复温方法处理兔肢体再植后骨骼肌病理学变化,从而为深低温处理后断肢再植可行性提供初步理论依据。方法:30只新西兰大白兔,随机分为实验组A、B组(A为慢速冷冻慢速复温组、B为慢速冷冻快速复温组)、对照组。对照组兔腿离断后直接进行标本制作。实验组在二甲基亚砜灌注,肝素盐水洗脱,经过慢速冷冻处理后,A组慢速复温、B组快速复温后再植,再植通血6小时后离断肢体,取骨骼肌同对照组制作标本。结果:大体观察:实验A组通血后肌肉颜色红润,质地好,有弹性,刺激有收缩。实验B组:通血后肌肉肿胀明显,质地差,弹性弱,刺激无明显收缩。HE染色病理切片组织学变化:对照组:肌细胞及细胞核形态正常,无肌纤维断裂,未见明显的空泡形成;实验A组:肌细胞轻度水肿,部分肌纤维断裂,但整个肌细胞形态较正常,少量炎性细胞浸润。实验B组:肌细胞水肿明显,肌细胞中大量空泡形成,大量肌纤维断裂,有大量炎性细胞浸润。电镜观察:对照组:肌节排列整齐,Z线清晰,线粒体嵴致密,细胞膜完整,无肿胀,结构正常。实验A组:肌纤维清晰可见,明暗带排列整齐肌膜完整,肌纤维间隙增宽,线粒体嵴数目减少或消失,线粒体轻度肿胀,极少数线粒体发生空泡化,未见线粒体碎裂,未见肌纤维的溶解。实验B组:肌纤维结构紊乱,大量肌纤维断裂并溶解,肌纤维间隙增宽,未见正常线粒体,线粒体明显空泡化及碎裂。结论:经慢速冷冻不同方法处理后兔断肢再植通血6小时,骨骼肌有不同程度的损伤。根据病理切片细胞损伤的情况进行统计学分析,对照组和实验组有明显统计学差异。实验组A和B组有明显统计学差异,慢速复温组骨骼肌损伤较小,为冷冻保护剂深低温处理后离断肢体行断肢再植远期肌肉组织结构的完整性提供了依据。
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