AP-1(activatorprotein-1)，是细胞接受外界刺激调节生物反应的一个重要的生物感受器。它是由Fos，Jun，ATF和MAF蛋白家族组成的同源或异源二聚体，属于亮氨酸拉链转录因子家族成员1,2，在哺乳动物细胞中以Fos和Jun为主，其中c-Fos和c-Jun组成的异源二聚体是其最稳定的形式。AP-1信号传导通路可以被生长因子，炎性细胞因子，UV和离子辐射，细胞应激，细菌和病毒感染，肿瘤转化剂等多种刺激激活。激活后的AP-1与TPA反应元件(TRE：5TGAC/GTCA-3)结合，调节下游基因表达。 AP-1作为对外界信号发生反应的转录因子而且位于信号级联反应的末端，使外界信号和细胞功能之间建立起一定的联系。有研究发现AP-1蛋白的激活与细胞的增生，分化，转化，凋亡，感染，生存和死亡，以及免疫反应相关7。那么寻找AP-1蛋白的激活物，无疑对于人类对抗肿瘤，感染，凋亡等疾病以及对生长发育的认识具有重要的意义。 本项研究即以构建AP-1信号传导通路高通量筛选细胞模型为目的，用于高通量筛选可以激活此信号传导通路的未知因子，以及高通量的分析某些药物在体内作用的特异性和效率，用以发现新药以及阐明某些药物的作用机制，为AP-1的研究提供一个简单有效的方法和工具。在本研究中，将AP-1的顺式作用元件TRE序列人工合成，与绿色荧光蛋白的基因连接，插入含有抗嘌呤霉素基因的载体。将载体整合入293E细胞的基因组中，利用嘌呤霉素筛选出稳定表达的细胞株，再利用敏感药物TPA，筛选出背景低而且敏感性高的细胞株作为信号传导模型。当有相应刺激作用于细胞时，通过一系列的激酶级联发应，激活AP-1蛋白，并转位进入细胞核，特异性结合于TPA反应元件TRE，诱导绿色荧光蛋白的表达，细胞发出绿色荧光。通过绿色荧光有或无的变化，确定该刺激是否能够有效的激活AP-1信号传导通路。 实验结果表明，成功建立了高效敏感的细胞通路模型，此模型具有操作简便，敏感性高，背景低，结果稳定等优点，可用于大规模高通量的药物筛选及分析。