本文对费氏中华根瘤菌WGF03中TsT和SiR基因的功能进行了鉴定。硫是所有生物体必需的化学元素之一。它与氮相互作用，不仅能够作为生物体大分子结构组分，而且还能在新陈代谢中发挥特定作用。近年来的研究表明根瘤菌结瘤因子中的还原性末端，其硫化修饰决定了根瘤菌的宿主专一性。硫代硫酸硫转移酶由TsT基因编码，通过NCBI网站的Blast比对，与Rhizobium sp.NGR234在核苷酸水平上有95％的一致性，在氨基酸水平上有98％的相似性。为了鉴定这个基因的功能，我们通过pK18mobsacB同源双交换的方式，构建TsT基因的缺失突变体TsTI。TsT基因缺失突变后，在以硫代硫酸钠为唯一硫源的MM培养基中，突变菌株TsTI不能生长，但是可以利用硫酸盐、亚硫酸盐、半胱氨酸和甲硫氨酸为唯一的硫源正常生长。植株实验发现，TsT基因突变后，根瘤菌的结瘤时间推迟1天，竞争结瘤的能力下降，单株的结瘤数量也有所下降，同时在瘤重、植株干重和固氮酶活方面与野生型菌株S.fredii WGF03存在显著差异。亚硫酸还原酶是硫代谢途径中的一个酶，催化亚硫酸盐还原为硫化物。该酶由SiR基因编码，通过NCBI网站的Blast比对，发现该序列与Rhizobiumsp.NGR234在核苷酸水平上有96％的一致性，在氨基酸水平上有98％的相似性。为了鉴定这个基因的功能，我们通过pK18mobsacB同源双交换的方式，构建SiR基因的缺失突变体SiRI。SiR基因缺失突变后，在以硫酸钠、亚硫酸钠为唯一硫源的MM培养基中，突变菌株SiRI不能生长，而野生型菌株WGF03和互补菌株CSIRI生长正常，但是突变菌株SiRI可以利用硫代硫酸盐、半胱氨酸和甲硫氨酸为唯一的硫源的正常生长。植株实验也证实，SiR基因缺失突变后，根瘤菌的结瘤时间推迟2天，竞争结瘤的能力下降，单株的结瘤数量也有所下降，同时在瘤重、植株干重和固氮酶活方面与野生型菌株S.fredii WGF03存在显著差异。