滇杨多倍体种质的诱导及鉴定

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滇杨(Populus yunnanensis Dode)是杨柳科杨属青杨派树种,又名云南白杨、白杨树、东川杨柳等。为我国西南地区特有的一种乡土树种,也是全国乃至世界少有的分布于低纬度高海拔地区的宝贵杨树资源。目前,滇杨相关的研究主要集中于其种质资源的收集、遗传多样性分析、分枝特性机理以及无性系快繁等方面。目前,国内外有关杨树多倍体育种主要集中于白杨派和黑杨派中,对生长于我国西南山区青杨派树种滇杨的相关研究鲜见报道。对滇杨进行多倍体育种遗传改良,为生产上提供生长迅速、材质优良的林木良种,对经济发展和生态改善均具有重要意义。本研究以滇杨的叶柄为材料,以秋水仙素结合组织培养的方法进行多倍体诱导,继而对诱导后的材料进行同质化培养,然后鉴定其倍性,并对多倍性特征稳定的材料进行保存、繁殖,主要研究结果如下:1.滇杨多倍体诱导时,以滇杨叶柄为外植体,首先在MS+0.5mg/L6-BA+0.05mg/LNAA的分化培养基中预培养5d,继而在附加有40mg/L秋水仙素的分化培养基中诱导处理2d,其诱导变异率可达51%。2.滇杨多倍化植株生根的最优条件为以MS+0.1mg/L IBA+0.1mg/L NAA+3g/L活性炭,生根率可达到90%且根毛较多,根的健康状况较好。3.形态学、解剖学等鉴定表明,菱形叶多倍化植株(嵌合体)及圆形叶多倍化植株(四倍体)叶片长、宽均大于二倍体;叶片单位视野内气孔数明显少于二倍体,气孔体积则大于二倍体,滇杨嵌合体及四倍体叶片厚度及栅栏组织厚度均较二倍体高,叶绿素含量也明显高于二倍体。4.光合作用日变化测定结果表明,滇杨嵌合体及四倍体植株的净光合速率在日变化过程中均高于二倍体;气孔导度、蒸腾速率则与二倍体差别较小;嵌合体、四倍体及二倍体的胞间CO2浓度在日变化过程中变化不明显。5.细胞学鉴定结果显示,滇杨的试管苗根尖材料在饱和对二氯苯溶液中在0℃(冰水混合物)条件下预处理1h,而后转入卡诺固定液中在0℃(冰水混合物)下固定1h,再在浓盐酸:无水乙醇=1:1的解离液中常温解离18min,利用常规压片法染色、压片,可获得良好的染色体制片效果。滇杨二倍体染色体数目为2n=2X=38,四倍体染色体数目为2n=4X=76;嵌合体在同一个根尖材料中同时发现38条染色体的细胞和76条染色体的细胞。6.对不同倍性的滇杨进行生长量观察,结果发现:嵌合体多倍化植株(菱形叶)和四倍体植株(圆形叶),其苗高和地径的生长量均明显高于二倍体。
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