人工诱导海南龙血竭的化学成分及生物活性研究

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血竭(dragon’sblood)是传统名贵中药,用于治疗跌打损伤、外伤出血、心腹於痛等症状。现代药理研究表明血竭主要含有黄酮类化合物,具有抗炎、止痛、抗痢疾、止泻、止血、抗溃疡、抗菌、细胞毒等多种药理活性。为解决不断增加的药用需求和有限的血竭产量之间的矛盾,本论文对人工诱导血竭的化学成分及其生物活性进行研究,为人工诱导血竭是否能够替代天然野生血竭提供科学依据。本研究运用多种色谱分离技术(薄层层析、硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、RP-C18反相柱色谱和制备高效液相色谱等)对海南人工诱导血竭粗提物进行分离纯化,通过波谱学方法(一维和二维核磁共振谱、高分辨质谱、电喷雾电离质谱、红外光谱、紫外光谱等)鉴定得到28个单体化合物,分别为:10-甲氧基-11-羟基龙血酮(1)、4-甲氧基-10,11-二羟基龙血酮(2)、1-甲氧基-2-甲基-10,11-二羟基龙血酮(3)、10,11-二羟基龙血酮(4)、10-羟基-11-甲氧基龙血酮(5)、7,10-二羟基-11-甲氧基龙血酮(6)、comboquartermer(7)、剑叶血竭素(8)、剑叶血竭素 I(9)、7,4’-二羟基-8-甲基黄酮(10)、7,4’-二羟基黄酮(11)、苏木查尔酮(12)、5-羟基-7-甲氧基-1-(4’-羟基苄基)-4-二氢色原酮(13)、(E)-3-(3,4-二羟基亚苄基)-7-羟基-4-二氢色原酮(14)、3-去氧苏木查尔酮(15)、3’-methoxy-socotin-4’-ol(16)、socotin-4’-ol(17)、剑叶血竭素 G(18)、(2S,γR)-8-methylsocotin-4’-ol(19)、4’-methoxy-8-methylsocotin-3’-ol(20)、(2S,yR)-3’-methoxy-8-methylsocotin-4’-ol(21)、homoisosocotin-4’-ol(22)、diospyrosin(23)、丁香树脂醇(24)、松脂醇(25)、杜仲树脂酚(26)、邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(27)、对羟基苯甲酸甲酯(28)。其中1-3、7和9为新化合物,10为新天然产物。从人工诱导血竭中分离鉴定的部分化合物和天然血竭的化学成分相同,新化合物的结构也只是取代基不同或者查尔酮类化合物环化或/和聚合。采用琼脂滤纸片扩散法测试部分化合物抗人体病原菌和植物病原菌活性。结果表明化合物7,4’-二羟基-8-甲基黄酮(10)和7,4’-二羟基黄酮(11)对耐甲氧西林葡萄球菌具有抑制活性。采用MTT法测试部分化合物的细胞毒活性结果表明化合物16、17和22对5株人癌细胞株具有明显的活性,半抑制浓度IC50值在1.4-28μM。3-去氧苏木查尔酮(15)对5株人癌细胞株具有中等强度的的抑制活性。综合分析人工诱导血竭的化学成分及其生物活性结果表明,人工诱导血竭具有替代天然野生血竭的潜力,但还需对其药理活性做更深入的研究。
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