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目的:1、研究在人结直肠癌LOVO细胞中,慢病毒转染过表达TCF21对KISS1基因表达水平的影响。2、观察慢病毒转染过表达TCF21后,结直肠癌LOVO细胞增殖、侵袭及迁移能力等生物学变化。3、分析TCF21慢病毒过表达结直肠癌LOVO细胞后,KISS1下游可能的PI3K/AKT-MMPs信号轴中关键分子PI3K、AKT、p-AKT、MMP-2、MMP-9等的表达情况。方法:1、以TCF21低表达的人结直肠癌细胞株LOVO为研究对象,采用慢病毒感染系统构建TCF21基因过表达稳定细胞株,分别通过实时荧光定量PCR和免疫印迹的方法检测细胞株中转染前后TCF21mRNA水平和蛋白水平的表达,鉴定TCF21在各细胞株中表达稳定性从而进行后续的研究。2、实验设置空白对照组、阴性对照组(空载体对照组)、TCF21基因过表达细胞组,通过免疫印迹的方法检测转染前后KISS1的蛋白表达水平的变化。3、用MTT的方法分析不同分组中结直肠癌细胞增殖的能力的变化;采用划痕和Transwell小室等功能学实验检测细胞转移和侵袭的能力的变化。4、应用免疫印迹方法检查转染前后各组中PI3K/AKT-MMP9信号轴中关键分子PI3K、AKT、p-AKT、MMPs进行蛋白表达水平的变化。结果:1、慢病毒包装的TCF21过表达载体成功转染LOVO细胞后,TCF21在mRNA和蛋白水平的表达均明显高于空白对照组,阴性对照组(空载体对照组),差异有统计学意义(P<0.05),TCF21在细胞中能够稳定过表达。2、与空白对照组和阴性对照组相比,TCF21基因过表达组KISS1的蛋白质表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。3、慢病毒成功过表达LOVO细胞后,MTT法显示细胞增殖能力明显减弱(P<0.05);划痕实验显示,细胞迁移能力明显减弱(P<0.05);Transwell小室实验显示,细胞侵袭能力亦明显减弱(P<0.01)。4、OE组转染TCF21基因后,PI3K的表达水平与CON组相比显著下降,有统计学意义(P<0.05),NC组和CON组相比无统计学差异(P>0.05)。OE组p-AKT的表达水平与CON组相比显著下降,有统计学意义(P<0.01),NC组和CON组相比无统计学差异(P>0.05)。OE组AKT的表达水平与CON组、NC组相比无统计学差异(P>0.05)。下游金属基质蛋白酶MMP-2的表达水平OE组与CON组相比显著下降,有统计学意义(P<0.05),NC组和CON组相比无统计学差异(P>0.05)。OE组MMP-9的表达水平与CON组相比显著下降,有统计学意义(P<0.05)。NC组和CON组相比无统计学差异(P>0.05)。结论:1、在结直肠癌LOVO细胞株中,过表达TCF21基因能够上调KISS1基因的表达,并导致细胞增殖、侵袭及迁移能力的下降。2、结直肠癌病变进展过程中KISS1基因可能是作为下游功能基因,接受TCF21基因的转录调控,并通过抑制PI3K/AKT-MMPs通路而发挥其肿瘤转移抑制效应。