哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)是近年来严重危害我国华南地区海水养殖动物的细菌性病原,为了探明该病原的分子致病机制,本文拟采用紫外诱变技术获得不同毒力的突变菌株,并采用基因组比较分析技术深度挖掘变异基因,旨在确定与哈维氏弧菌毒力相关的主要基因。采用紫外诱变技术,获得了2361株突变菌株,大量菌株无法正常培养(很可能进入了活的不可培养状态);采用单因子试验,确定了诱变菌株的最佳培养基(添加终浓度为0.18m L/m L的吐温20和2mg/m L的复合维生素B的2216E培养基),并成功实现了1222株紫外诱变菌株的人工培养。以凡纳滨对虾的幼虾为试验动物,通过肌肉注射感染试验,结果表明,在紫外灯功率为15W、照射距离为30cm条件下照射时长为270s时,弱毒菌株产生的概率可达63%,因此,该条件为获取哈维氏弧菌GDH11385弱毒突变菌株的理想条件;共获得378株弱毒株(毒力小于野生株,24h内人工感染死亡率低于50%),41株强毒株(毒力大于野生株即2h人工感染死亡率等于100%)。所有弱毒株经连续传代培养后,最终获得了可以稳定遗传的弱毒菌株89株,其中包含无毒菌株31株。利用第三代测序技术对诱变后4株无毒菌株(s11、s31、s41和s51)进行重测序,并以野生型菌株GDH11385的基因组测序结果为参考进行分析,结果表明,4株诱变菌株的基因组被测序列总长为5,046,212bp～5,126,831bp,GC含量为45.20%～45.31%;4株菌株的编码基因片段累积长度占总基因组长度为84.39%～85%;菌株s11、s31、s41和s51的串联重复序列分别占其基因组的0.2743、0.2375、0.2908和0.346;菌株s11、s31、s41和s51的小卫星DNA分别占其基因组的0.0601、0.0364、0.0399和0.0447;菌株s11、s31、s41和s51的微卫星DNA分别占其基因组的0.0077、0.0091、0.0091和0.0128。通过与野生型菌株的基因组比较分析,发现4株菌株均缺失编码T1SS的基因;利用细菌病原体的毒力因子数据库(VFDB)对野生株和4株无毒菌株的基因组序列进行注释,结果表明,acf A和acf B等共28个基因并不是哈维氏弧菌的毒力相关基因;确定了编码T1SS的基因并不是哈维氏弧菌的毒力相关基因;同时确定有221个毒力相关基因同野生菌株的强致病力有关。